《表1 基因部件介绍:基于SOS反应及氧化应激反应相关启动子的辐射生物传感器研究》

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《基于SOS反应及氧化应激反应相关启动子的辐射生物传感器研究》


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经基因工程改造的微生物成为一种新兴原位检测技术,工程化的大肠杆菌已被广泛用作生物传感器,本研究利用合成生物学方法和基因工程手段构建了以SOS反应和氧化应激反应相关基因RecA、SulA、Cda、SoxR作为启动子,以信号更加稳定、检测更加方便(最大激发峰红移到488nm处,最大发射峰510~520nm)的突变型绿色荧光蛋白基因EGFP作为报告因子的质粒表达载体,该增强型绿色荧光蛋白氨基酸序列的65位丝氨酸(Ser)突变成苏氨酸(Thr),并通过密码子简并性优化了基因序列,将该表达载体导入宿主大肠杆菌。辐射刺激后,依据表达出的荧光蛋白强度来评估环境中物理辐射导致生物体产生的氧自由基水平及生物损伤效应大小[41],基因线路如图1所示,基因各部件见表1。