《表5 基因组精简目前常用的技术原理》

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《基于枯草芽孢杆菌产物应用的基因组精简研究进展》

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基因组简化可从自下而上和自上而下两种方法得以实现[44]。前一种方法从必需基因合成最小细胞，后一种方法通过删除非必需基因组区域来简化现有基因组。与自下而上相比，自上而下的策略实现基因组删减的可操作性更强。基因组精简目前常用的技术主要基于同源重组、位点特异性重组、双链断裂修复重组、转座重组、噬菌体转导技术的精简以及新兴的基于CRISPR/Cas9的精简（表5）。本文主要介绍基于同源重组、位点特异性重组及新兴的基于CRISPR/Cas9的B.subtilis基因组精简。