《表3 AbCYP80F1基因启动子中顺式作用元件》

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《颠茄AbCYP80F1基因的克隆与功能分析》

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采用热不对称PCR(TAIL-PCR）技术对AbCYP80F1基因进行5’端染色体步移（Genome Walking），扩增AbCYP80F1基因启动子序列。3轮TAIL-PCR分别获得了559、421、2 544 bp的侧翼片段，经拼接后得到了一条3 059 bp的启动子序列，选取转录起始位点上游2 000 bp进行顺式作用元件分析，结果见图4和表3。AbCYP80F1基因启动子上游包含保守的TATA-box（-35区）和CAAT-box（-155区），除了这2个真核生物基因转录最基本的元件以外，还包括一些信号响应元件和转录因子识别结合元件。涉及的信号包括光（2个AE-box、3个Box 4、2个G-box、1个GT1-motif和1个TCT-motif）、无氧（1个ARE）、生长素（1个AuxRR-core）、茉莉酸（1个CGTCA-motif）、赤霉素（1个GARE-motif）和低温（3个LTR）。相关的顺式作用元件对应的转录因子有MYB(1个MBS和1个Myb-binding site）、AP2/ERF(4个RAV1AAT）、WRKY(3个W-box），尤其值得注意的是有11个bHLH转录因子识别的E-box元件。此外，还有1个分生组织表达相关的CAT-box和1个光敏色素下调表达相关的Unnamed-1元件。