《表3 LYK5基因启动子中参与调控的顺式作用元件及其功能》

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《枸橼C-05抗柑橘溃疡病相关PRR基因LYK5的初步鉴定》

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为分析枸橼C-05抗性是否是由LYK5基因启动子差异引起的LYK5基因表达上调从而引起与其他柑橘种质之间的抗性差异，对枸橼C-05及冰糖橙LYK5基因启动子进行扩增克隆和测序，为更准确得到与枸橼C-05抗性相关的LYK5基因启动子作用元件，将与枸橼C-05同属枸橼类的爪哇柠檬、印度大果和柠檬加入对照。PCR扩增各柑橘种质LYK5基因启动子，目的条带为1 500～2 000 bp大小，目的条带回收后连接至T载体pEASY-T5 zero载体，取5个阳性单克隆进行测序。测序结果显示冰糖橙的LYK5基因启动子大小为1 985 bp，枸橼C-05的LYK5基因启动子大小为1 938 bp，印度大果的LYK5基因启动子大小为2 025 bp，爪哇柠檬的LYK5基因启动子大小为1 789 bp，柠檬的LYK5基因启动子大小为1 486 bp（图6）。对各启动子关键顺式作用元件预测后分析各启动子作用元件的差异，LYK5基因启动子片段中都存在光响应元件、MYB结合位点参与干旱诱导、防卫基因激活相关元件、真菌诱导响应元件、胚乳表达所需的顺式作用元件、TATA-box等顺式作用元件，其他元件不同柑橘中有些存在，有些缺乏（表3）。但是发现枸橼C-05缺少激活分生组织特异性调控元件（表3），推测该作用元件可能与枸橼C-05 LYK5基因表达上调相关。