《表1 LMP2和LMP7基因的引物序列》

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《云南省汉族人群LMP基因多态性与结核病易感性的关联性研究》

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设计SNP位点特异性的扩增引物和延伸引物，扩增引物和延伸引物信息见表1。扩增体系为模板DNA（25 ng）、上下游引物（10μmol/L）各2μL、TSINGKE金牌Mix45μL，总反应体系50μL。PCR扩增反应条件:98℃预变性2 min，98℃变性10 s、60℃退火10 s、72℃延伸10 s（共30个循环）。PCR产物经SAP消化（37℃1 h、75℃15 min）后进行单链延伸，延伸体系:SAP消化后模板2μL、ABI SnapShot multiplex Mix 2μL、SNP对应引物1μL；延伸反应条件:98℃10 s、50℃5 s、60℃30 s（25个循环）。经测序仪（Applied Biosystems，3730XL）检测后通过峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知渗入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。LMP2和LMP7基因的扩增引物和延伸引物信息见表1。