《表1 引物合成序列：柯萨奇病毒A16型VP1亚单位疫苗构建》

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《柯萨奇病毒A16型VP1亚单位疫苗构建》

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E.coli BL21（DE3）、质粒pET32a（+）、pET32-LTB均由重庆医科大学生物化学与分子生物学教研室保存。SolutionⅠ连接酶、Bam HⅠ、Eco RⅠ、SalⅠ、NotⅠ、2×PCR Solution Premix Taq TM（Ex Taq TM Version 2.0）均购自宝日医生物技术（北京）有限公司。BCA蛋白浓度测定试剂盒、PBS缓冲液粉末、96孔酶标版均购于北京鼎国生物有限公司。BeaverBeads TM His-tag Protein Purification磁珠购于海狸纳米科技（苏州）有限公司。HRP-羊抗鼠Ig G和His-tag Mouse mAb购于博士德生物工程有限公司。所有引物和pUC57-CVA16VP1由上海捷德生物工程有限公司合成（表1）。健康清洁级Balb/c小鼠购于重庆医科大学动物实验中心（合格证号:SYXK(渝）2002007)，本实验经重庆医科大学伦理委员会批准。