《表1 鹿茸多肽对小鼠肠道菌群结构的影响》

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《鹿茸多肽对小鼠肠道菌群的影响》

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注:同行中肩标小写字母表示差异显著（P<0.05），大写字母表示差异极显著（P<0.01）。

采用细菌通用引物:27f（5-GAAGAGTTTGAT-CATGGCTCAG-3）5’端用FAM标记；342r（5-CTGCTGC-CTCCCGTAG-3）和25μL常规PCR体系进行扩增。反应条件为94℃预变性5 min，94℃变性60 s、56℃退火60 s、72℃延伸90 s，持续30个循环后72℃延伸10 min。PCR产物经限制性内切酶Hha I酶切。酶切体系为Tangobuffer 5μL、PCR产物15μL、Hha I内切酶2μL，加dd H2O至50m L，混匀后于37℃酶切6h。酶切产物用ABI3730基因检测仪（ABI，USA）进行T-RFLP分析。Standard-500（ABI，USA）作为T-RFLP分析的分子内标。结果对T-RFLPs进行统计，每个峰代表1个末端限制性片段。统计数值采用二元统计（有峰计为1，无峰计为0），按照统计数值进行聚类分析，以分析研究不同层位的细菌群落结构。采用SPSS 17.0统计软件（SPSS，USA）进行统计分析，分别采用Hierarchical和K-mean 2种聚类方法进行聚类分析。