《表1 水稻盐胁迫相关基因qRT-PCR引物序列》

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《水稻根系盐胁迫响应miRNA和tRF的鉴定》

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分别以日本晴盐处理/非盐处理根系总RNA为模板，利用Mir-XTM mi RNA First-Strand Synthesis试剂盒（Ta Ka Ra）加A法进行反转录合成c DNA第一链。利用TB GreenTM Premix Ex TaqTMⅡ（Ta KaRa）荧光定量试剂盒在CFX96 Real-Time PCR Detection System实时定量PCR仪上对转录组数据表达差异的3个mi RNA基因（mi R156、mi R167和mi R396）进行定量分析。miRNA的定量引物使用其成熟序列（U用T取代）作为qRT-PCR的正链引物（F）（表1），试剂盒中的m RQ3'作为负链引物（R）。内参为U6，qRT-PCR引物列于表1中，每个反应设有3个生物学重复和3次技术重复。采用2–ΔΔCt方法[26]计算基因的相对表达量，并利用T测验分析基因的表达差异。