《表1 Real-time PCR引物序列》

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《外源信号分子诱导处理对甜瓜抗病MAPK基因表达的影响》


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MAPK引物由奥科鼎盛生物有限公司合成(表1)。采用CTAB法提取甜瓜总RNA,cDNA第一条链用PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser合成试剂盒合成。以经过MeJA、ABA和MT不同时间处理的抗病和感病甜瓜叶片的cDNA为模板,PCR反应体系:模板1.0μL,上、下游引物各0.8μL(10μmol·L-1,表1),dNTP Mix 10μL(10 mmol·L-1),加ddH2O补足至20.0μL。PCR反应程序:95℃2 min,95℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,33个循环,72℃10 min,4℃保持。PCR产物利用1%的琼脂糖凝胶电泳检测。