《表1 各种克隆及组装技术的比较》

  提示：宽带有限、当前游客访问压缩模式

本系列图表出处文件名：随高清版一同展现

《基因克隆及组装技术的研究进展》

1. 获取 高清版本忘记账户？点击这里登录

1. 下载图表忘记账户？点击这里登录

本文主要对各类重组方法的优缺点进行了对比，对各种方法的效率和实用性进行了评价（表1）。Gateway技术在高通量克隆、重复克隆等方面具有独到的优势，但各种特异性重组位点和目的载体种类的缺乏限制了实验选择。相比之下SLiCE技术和Red/ET重组的主要优点是重组过程不需要可能干扰实验的特异性重组位点[38]。然而，它们的显著缺点是重组的准确性较Gateway技术低，重组产物需要进行后期测序验证，SLiCE对大片段基因的克隆能力有限，比较适合小分子DNA的组装[39]。CATCH技术和ExoCET技术都可以对大片段DNA进行直接克隆，但它们也有各自的优势和缺陷，CATCH组装时会残留大量的空载导致假阳性现象，且这种方法目前似乎只适用于原核基因组。而ExoCET在没有可以定位切割的限制位点的情况下，也很难从基因组中分离出目的基因进行后续工作。未来可以将两种技术结合起来，在ExoCET技术没有限制位点时，利用CATCH技术中的Cas9作为体外内切酶开发一种新技术[40]。