《表6.抗体介导的蛋白功能抑制部分应用案例》

《表6.抗体介导的蛋白功能抑制部分应用案例》   提示:宽带有限、当前游客访问压缩模式
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《哺乳动物雌性生殖细胞及早期胚胎基因敲除或敲减的方法》


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抗体介导的基因功能干扰的缺点是,如果使用显微注射方法将抗体导入卵母细胞,同其他显微注射方式一样,对卵母细胞造成机械性损伤,可能会导致第一极体排放延迟[82]。此外,商业化抗体产品中常添加叠氮钠和甘油等物质,如果不对这些物质进行预处理,也会造成细胞的非特异性应激反应。再者,如果导入细胞中抗体的特异性不高,会造成脱靶效应。与针对DNA或mRNA靶向方法相比,评估抗体的特异性更加困难,无法通过Western blot和免疫荧光等方法对蛋白的敲减效果进行直接验证。而且,对于卵母细胞内某些高丰度蛋白,单一使用抗体抑制技术无法有效实现对功能蛋白的沉默,从而使未被沉默的功能蛋白继续发挥作用,因此很少有研究人员仅通过注射抗体的方式得出有效结论。最后,如果抗体仅识别靶蛋白的非功能区段,而不影响靶蛋白功能区段的功能发挥,则会大大降低对靶蛋白的功能抑制效率。