《表1 PCR引物的详细信息》

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《天津市家庭农场养殖粪污耐药基因赋存特征及风险评估》

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采用Fast DNA SPIN Kit for soil试剂盒（MP Biomedicals，LLC，Santa Ana，CA，美国）按操作手册对0.5 g粪便和0.5 g土壤进行DNA提取，采用超微量紫外可见光分光光度计检测DNA样品纯度。对每个DNA模板进行普通PCR检测，PCR反应体系为25μL，包括12.5μL 2×EasyTaq PCR SuperMix（TransGen Biotech，Beijing，China）、上下游引物各0.5μL(10μmol·L-1）、0.5μL DNA模板和11μL ddH2O。反应条件为95℃预变性5 min，35个循环包括95℃变性30s，退火30 s（退火温度详见表1），72℃延伸30 s至1min。特异性引物详细信息见表1。最后采用1%琼脂糖凝胶电泳检测，确定扩增产物是否含有目的基因，详细步骤见参考文献[14]。