《表1 qPCR引物序列：lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为》

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《lncRNA XIST通过miR-32-5p/EZH2分子轴调控结直肠癌HCT-8细胞的恶性生物学行为》

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收集临床组织和转染细胞，用TRIzol试剂盒分别提取组织和细胞的总RNA，并用琼脂糖凝胶电泳检测RNA的浓度。随后进行逆转录合成cDNA，按照SYBR GREEN试剂盒说明对lncRNA XIST和miR-32-5p表达水平进行检测，以U6作为内参。采用Primer Prenier5.0软件进行引物设计，各引物序列见表1。随后，按试剂盒说明建立终体积为20μl的PCR反应体系[2μl反转录产物、10μl SYBR Green Mix、上下游引物（10μmol/l）各0.5μl及7μl dH2O]。PCR热循环参数为95℃5 min，然后3步反应：94℃变性30 s、60℃退火30 s，进行45个循环。检测结果采用2-ΔΔCt法进行计算。