《表1 引物信息:不同地方猪种背部皮下脂肪中miR-206差异表达研究》

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《不同地方猪种背部皮下脂肪中miR-206差异表达研究》


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注:5S、18S和U6为内参基因。

脂肪组织的RNA按照miRNeasy Mini Kit(Qiagen,China)的操作说明书提取,QRT-PCR采用miS-criptⅡRT Kit(Qiagen,China)根据操作说明将RNA转录成cDNA,采用miScript SYBR誖Green PCR Kit(Qiagen,China)在CFX96 Real-Time PCR Detection System(Bio-Rad,USA)仪器上进行荧光定量检测,每个反应体系20μL。以5S、18S和U6作为荧光定量PCR的内参基因,引物信息见表1。所有目的mRNA定量结果均通过熔解曲线分析验证PCR产物的特异性,确保产物无引物二聚体,每个样本重复3次,每次检测含3个阴性对照。采用2-ΔΔCt法计算目的miRNA的相对表达量。