《表2 硅藻土的用量对发酵液抽滤的影响》

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《胶质芽孢杆菌SM-01胞外多糖提取纯化工艺》

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硅藻土除了作为过滤介质，还是一种理想的吸附剂，能够有效吸附菌体和杂蛋白质，且在发酵液中预先添加硅藻土还可以起到助滤剂的作用，抽滤效果更为理想，但过高的添加量通常会造成抽滤效率的下降和多糖的损失，因此应对硅藻土的添加量进行考察。初始发酵液去除多余CaCO3，加入3%NaCl，稀释3倍后，再加入一定量的硅藻土，充分搅拌后再进行抽滤。由表2可知，无硅藻土添加时滤液中蛋白质质量浓度已经比较低（0.025 g/L），通过硅藻土抽滤基本可以去除发酵液中的少量蛋白质。当加入10 g/L硅藻土后，滤液中菌体和蛋白质的质量浓度都有一定程度的降低，继续加入硅藻土对去除菌体和蛋白质并没有显著的影响，但是过量硅藻土则会同时吸附多糖，使滤液中多糖的质量浓度下降，多糖损失增加。因此采用10 g/L的硅藻土预吸附，再进行抽滤可以有效除去大部分菌体和蛋白质，经过反复抽滤三次后，通过对滤液进行镜检可以发现无菌体存在，说明菌体已经被完全去除，经检测蛋白质质量浓度接近零，多糖回收率可达76.4%。