《表1 缓冲液/丙三醇体系中各浓度底物在12 h时的水解结果》

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《菜豆环氧水解酶归一性水解间硝基环氧苯乙烷的研究》


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基于上述筛选的结果,构建含有5%(V/V)丙三醇的缓冲液反应体系,并研究了20-50 mmol/L rac-m NSO的水解情况(表1)。当反应进行到12 h时,40 mmol/L及以下浓度底物的c值超过95.0%,且(R)-m NPED的产率均超过90.0%。但是,当rac-m NSO继续提升至50 mmol/L时,高细胞浓度(40 mg干细胞/mL约相当于250 mg湿细胞/mL)的E.coli/pveh2无法有效将其水解。因此,在缓冲液/丙三醇体系内,最高底物浓度由原先单缓冲液体系的10 mmol/L提高至40mmol/L。另外,底物在归一性水解反应进程中的代表性HPLC色谱图如图6所示。