《表1 real-time PCR引物序列》

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《IL-33在呼吸道合胞病毒(RSV)感染致哮喘急性发作中的作用》


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按说明书抽提肺组织总RNA,反转录合成cDNA。PCR反应体系为20μL(表1),包括2×AceQ PCR SYBR Green Master Mix 10μL、ROX Reference Dye 2 0.4μL、上下游引物各0.4μL和cDNA模板2μL。采用荧光定量PCR仪扩增(型号:Applied Biosystem 7500)。PCR反应条件为:95℃5 min;95℃15 s,60℃45 s,40个循环;95℃15 s,60℃1 min,95℃15 s,60℃15 s。