《表1 抗菌药物稀释范围、质控菌株质控范围及药敏试验结果判定标准》

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《副溶血弧菌养殖对虾分离株耐药性及耐药基因分析》

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注：-.缺少相应的参考数据

DNA提取采用TIANGEN细菌基因组试剂盒进行提取后对耐药基因进行PCR扩增。扩增体系一致，即DNA模板、正向引物（F）、反向引物（R）各1μL，Taq聚合酶12.5μL，无菌水定容至25μL。耐药基因引物参照文献，具体见表1。反应条件为95℃预变性5 min，95℃变性1 min、退火40 s（退火温度见表2），72℃延伸（延伸时间视产物长度而定），35个循环后72℃延伸10 min。PCR产物经1%琼脂糖凝胶120 V电泳30 min后，用凝胶成像仪器观察结果，并将目的产物送上海生工生物工程有限公司进行测序，测序结果经BLAST与已知序列比对以验证其基因型。