《表1 生物质谱中重要的质谱碎裂技术》

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《串联质谱法在合成多肽药物结构确证中的应用进展》


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与其他分子一样,化学成分的阐明是确定肽同一性的基础,包括阐明氨基酸及其在肽链中的排列顺序,即一级结构/序列。传统氨基酸测序方法为Edman降解法,但该方法一般用来测定N端氨基酸;此外,Edman测序和串联质谱相结合也是目前常用的一种方法,可用于阐明含有二硫键的复杂肽,例如降钙素鲑鱼的一级结构[17]。采用串联质谱法测定肽序列时通常使用碰撞诱导解离(CID)碎裂技术,但如果序列覆盖度差,应考虑采用其他的质谱碎裂技术[18-23](见表1)。对于含有20个以上氨基酸残基的长肽,如不能直接确定其序列,可进行多肽肽图的分析,分析过程一般是用专一性较强的蛋白水解酶(一般为肽链内切酶)对多肽进行水解,再用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)确定各肽段。