《表1 文献报道的CESCs分离方法》

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《椎间盘软骨终板干细胞及其在椎间盘退变和修复中作用的研究进展》

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干细胞的筛选和纯化对干细胞的研究具有重要意义。既往研究表明干细胞在组织内的含量极低，Harris等[18]对椎间盘内各个部位干细胞的含量进行研究，发现每0.8 mm厚度终板软骨内仅有18 500～61 875个干细胞。因此，分离纯化干细胞并进行体外扩增极其重要。文献报道的间充质干细胞分离方法主要有差速贴壁法、组织消化法、梯度离心法、免疫磁珠筛选法[19]。由于组织来源的差异性，造成选择的分离方法不同。琼脂糖三维悬浮培养基是一种筛选培养基，有文献报道只有软骨细胞或肿瘤细胞才能在其中生存，并且利用这种方法能够成功分离软骨干细胞[9]。Liu等[10]首先利用这种琼脂糖三维悬浮培养基在低细胞密度条件下分离CESCs，结果证实这种方法分离出的细胞克隆团符合干细胞的标准，目前多数文献也都采取这一方式分离CESCs[20]。文献报道的其它针对CESCs分离方法有单克隆法、差速贴壁法、Fibronectin差别黏附筛选法[21-27]。上述方法均可成功分离CESCs，据文献报道所获得的CESCs表面标记>90%，且能够三系分化，符合干细胞鉴定标准（表1）。然而，目前尚缺乏对比实验研究来确定最适合于CESCs的筛选方案。