《遗传学实验方法和技术》

目 录1

实验一细菌结合和基因定位1

实验二基因互补测验4

实验三基因精细结构定位（缺失定位）6

实验四 化学诱变剂的细菌检测法（Ames法）9

实验五转导实验之一——枯草杆菌噬菌体普遍性转导14

实验六转导实验之二——大肠杆菌λ噬菌体局限性转导17

实验七地衣芽孢杆菌染色体DNA的提取20

实验八 细菌质粒DNA的提取22

〈附〉琼脂糖凝胶电泳检查DNA30

实验九转化实验之一——枯草杆菌感受态细胞转化32

实验十转化实验之二——大肠杆菌转化35

实验十一转化实验之三——枯草杆菌原生质球转化37

实验十二DNA体外重组技术——地衣芽孢杆菌的β－内酰胺酶基因的无性繁殖40

* * * * *46

实验十三细胞核的分离46

实验十四染色质的分离53

〈附1〉从细胞核分离染色质的方法56

〈附2〉高等真核生物染色质分离的参考资料60

实验十五染色质的组成成份分析64

〈附1〉Folin酚法测定蛋白质含量67

〈附2〉二苯胺法测定DNA含量68

〈附3〉地衣酚法测定RNA含量70

实验十六染色质组蛋白的分离和乙酸－脲电泳分析71

实验十七高盐－脲法分离染色质非组蛋白（羟基磷灰石柱层析）75

验实十八酚溶性染色质非组蛋白制备和SDS电泳78

实验十九 染色质非组蛋白的双向电泳分析（IF-SDS-PAGE）82

验实二十高迁移率非组蛋白（HMG）的分离和电泳分析86

* * * * *89

实验二十一 四膜虫rRNA基因（rDNA）的选择性提取与纯化89

实验二十二DNA分子杂交（Southern法）95

实验二十三核外基因组——线粒体DNA的制备108

〈附〉紫外吸收法测定核酸含量113

实验二十四染色质核小体的电镜制片方法115

实验二十五核酸的电子显微镜技术——DNA的碱性蛋白膜展层方法117

实验二十六细胞核和染色质的体外转录活性测定123

实验二十七 鸭卵清蛋白mRNA的分离和纯化127

实验二十八用麦胚无细胞体系测定卵清蛋白mRNA的翻译活性130

〈附〉兔网织红细胞溶胶体外翻译体系（RLL）134

* * * * *135

实验二十九 免疫沉淀技术纯化免疫mRNA135

实验三十 免疫mRNA的体外翻译体系——细胞学方法检测抗体形成139

〈附〉溶血空斑法检测免疫RNA或免疫mRNA144

* * * * *147

实验三十一乳酸脱氢酶（LDH）同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳147

〈附1〉LDH同工酶淀粉凝胶电泳152

〈附2〉LDH同工酶醋酸纤维薄膜电泳154

〈附3〉LDH同工酶琼脂糖凝胶电泳155

实验三十二LDH同工酶亚带的电泳分析156

实验三十三LDH同工酶的亲和层析161

* * * * *167

实验三十四 骨髓细胞染色体的制备与观察（小鼠与鸡）167

实验三十五外周血淋巴细胞的培养与染色体的制备（人类与两栖类）170

实验三十六从组培细胞中制备染色体（恶性肿瘤细胞的核型分析）175

实验三十七结构性异染质与功能性异染质（C带技术与X染色质的显示）177

实验三十八核仁组成区的显示及其多态现象180

实验三十九 染色体的G带核型182

实验四十 姐妹染色单体区分着色和姐妹染色单体交换（SCD和SCE）186

实验四十一染色体的复制顺序188

实验四十二小鼠减数分裂标本的制备与观察190

实验四十三用标记有丝分裂细胞追踪法测定细胞周期及各时相的时长191

实验四十四果蝇唾腺染色体与神经节染色体的比较观察197

实验四十五 摇蚊多线染色体的转录实验之一——摇蚊多线染色体的206

斑带和“泡”（松散区）206

实验四十六摇蚊多线染色体的转录实验之二——“泡”（松散区）的转录活性210

实验四十七果蝇（D.melanogaster）基因连锁关系的测验与基因定位212

* * * * *217

实验四十八遗传毒理技术之一——果蝇X染色体隐性致死突变的检出217

实验四十九 遗传毒理实验技术之二——用小鼠骨髓嗜多染红细胞微核测定法检测染色体畸变222

* * * * *224

实验五十环境因素对果蝇（D.melanogaster）发生量的影响——基因型与环境的互作分析224

实验五十一数量性状的遗传参数——遗传力的估计228

实验五十二果蝇某数量性状对于选择的反应234

一器物和溶液的灭菌241

附录241

* * * * *241

二微生物实验的常用器材和培养基243

三组织和细胞培养的几种合成培养基249

四组织和细胞培养的常用溶液253

五常用的限制性核酸内切酶的特性256

六常用的质粒及其衍生物（载体分子）的一些性质258

七聚丙烯酰胺凝胶电泳的常用系统260

（一）试剂的物化性质260

（二）凝胶系统261

（三）分离区带的染色法270

（四）常用参考蛋白质分子量271

八常用的同工酶的检验法272

九常用缓冲液的配制方法275

十硫酸铵饱和度的常用表281

十一某些生物大分子、亚细胞器及微生物的沉降系数282

十二离心机转数（rpm）与相对离心力（RCF）的换算283

十三层析法常用数据表284

十四氨基酸的一些物理常数291

十五核苷、核苷酸及其衍生物的一些物理常数293

十六实验室中常用酸碱浓度和比重的关系299

十七一些常用化合物的溶解度（20℃）301

十八某些有机溶剂的主要物理常数302

十九冷却剂和干燥剂302

二十化学试剂的分级和保存方法304

二十一一些常用单位305