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实验一 铜试剂法测定还原糖1

第一章 糖1

实验二 费林试剂法测定还原糖6

实验三 3,5-二硝基水杨酸比色定糖法9

实验四 细菌细胞壁糖的薄层层析11

实验五 葡糖-1-磷酸的制备及其纯度测定17

实验六 红细胞膜的制备及其结构成分的分析21

一、红细胞膜的制备21

第二章 脂类21

二、膜蛋白的分析(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法)23

三、膜磷脂的分析(薄层层析法)24

四、膜胆固醇的测定26

实验七 猪心肌线粒体、亚线粒体的制备及可溶性腺三磷酶的提纯28

实验八 猪心线粒体腺三磷酶复合体在脂质体上的重组32

第三章 蛋白质37

实验九 苯甲酰L-酪氨酰胺的合成37

实验十 N-乙酰-L-酪氨酸乙酯的合成41

实验十一 双甘二肽的合成44

实验十二 胱氨酸的制备48

实验十三 量气法测定氨基酸——VanSlyke仪测定α-氨基氮51

实验十四 总氮量的测定——微量凯氏定氮法55

实验十五 蛋白质中色氨酸含量的测定60

实验十六 蛋白质及肽的N-末端氨基酸DNS分析法——聚酰胺薄膜层析技术62

实验十七 蛋白质及肽的顺序分析——PTH分析法67

实验十八 蛋白质及肽的N-末端氨基酸FDNB分析法71

实验十九 邻苯二甲醛荧光分析法及其在肽检测中的应用80

实验二十 血清蛋白质的纸上电泳83

实验二十一 血清脂蛋白的琼脂糖凝胶电泳90

实验二十二 聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳分离蛋白质94

实验二十三 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的分子量112

实验二十四 聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳法测定蛋白质的分子量119

实验二十五 蛋白质分子量的测定——凝胶层析法124

实验二十六 细胞色素c的制备及测定133

实验二十七 鸡卵类粘蛋白的制备138

第四章 酶143

实验二十八 脲酶的动力学研究145

〔附〕康维微量等温蒸馏定氨法152

实验二十九 酰化酶I的制备和活力测定155

〔附1〕氨基酸含量的测定法:茚三酮溶液显色法,甲醛滴定法160

〔附2〕蛋白质含量的测定法:双缩脲法,Folin-酚试剂法,紫外吸收法164

实验三十 猪胰蛋白酶的结晶和活力测定169

实验三十一 从生产胰岛素后的猪胰残渣中制备胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶175

实验三十二 辣根过氧化物酶的制备和活力测定179

实验三十三 结晶乳酸脱氢酶的制备183

实验三十四 大肠杆菌碱性磷酸酯酶的制备188

实验三十五 羧肽酶Y的分离提纯195

实验三十六 限制性内切酶EcoRI的纯化和活力测定201

实验三十七 亲和层析法纯化胰蛋白酶206

实验三十八 亲和层析法分离牛脾二肽酶I209

第五章 核酸216

实验三十九 动物肝脏RNA的制备(苯酚法)和纯度测定216

〔附1〕紫外吸收法测定核酸含量218

〔附2〕二苯胺显色法测定DNA含量219

〔附3〕地衣酚显色法测定RNA含量220

〔附4〕定磷法测定核酸含量221

实验四十 酵母和白地霉RNA的制备(稀碱法和浓盐法)224

实验四十一 酵母转移RNA的制备(苯酚法)225

实验四十二 小牛胸腺DNA的制备(浓盐法)227

实验四十三 质体的分离、纯化和鉴定229

实验四十四 细胞核的分离239

实验四十五 大鼠肝细胞染色质的分离242

实验四十六 RNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳244

实验四十七 DNA的琼脂糖凝胶电泳247

实验四十八 离子交换柱层析分离核苷酸251

实验四十九 高压纸上电泳法分析鉴定核苷酸255

实验五十 肌二磷和胞二磷的化学合成258

第六章 组织代谢265

实验五十一 瓦氏呼吸计测压法及组织呼吸强度的测定265

一、瓦氏呼吸计测压法265

二、组织耗氧量的测定271

实验五十二 D-系-α-氨基酸的氧化脱氨基作用276

〔附〕等温蒸馏定氨法280

实验五十三 用液氮固定法研究动物的新陈代谢——自然缺氧条件下机体乳酸含量变化的测定281

实验五十四 用滤纸定量层析法研究大白鼠在自288

然缺氧状态下脑组织中游离氨基酸含量的变化288

第七章 免疫化学300

实验五十五 免疫吸附亲和层析法分离、纯化甲胎蛋白301

实验五十六 免疫电泳技术310

一、双向免疫扩散法311

二、微量免疫电泳313

三、对流免疫电泳315

四、单向定量免疫电泳(火箭电泳)316

五、双向定量免疫电泳318

实验五十七 用免疫荧光法观察甲胎蛋白在人胚肝中的分布319

第八章 放射性同位素325

实验五十八 放射性焦磷酸盐(32PPi)的制备333

实验五十九 酶促合成高比放射性γ-32磷-腺三磷337

实验六十 放射性焦磷酸(32PPi)-腺三磷交换法测定核糖核酸连接酶活性342

实验六十一 寡核苷酸的同系层析分离及鉴定344

(二)实验室灭火法350

(一)实验室安全知识350

附录350

一、实验室安全及防护知识350

(三)实验室急救351

二、实验室常识352

三、玻璃仪器的洗涤及各种洗液的配制法354

四、一些重要仪器的使用法355

(一)酸度计355

(二)分光光度计358

1.72型分光光度计358

2.751型分光光度计360

(三)部分收集器及紫外检测仪362

(四)荧光分光光度计364

(五)冰冻离心机365

五、缓冲溶液369

(一)一些常用作缓冲剂的化合物的酸解离常数370

(二)常用缓冲溶液的配制方法371

六、生物化学中某些重要化合物的分子量及pK值376

七、某些重要生化物质的克分子消光系数377

八、氨基酸的一些物理常数380

九、某些蛋白质的物理性质382

十、核苷、核苷酸及其衍生物的一些物理常数382

十一、某些生物大分子、亚细胞器及微生物的沉降系数388

十二、指示剂389

十三、冷却剂和干燥剂390

(一)离子交换纤维素392

十四、层析法常用数据表392

(二)常用离子交换树脂某些物理化学性质表393

(三)各类常用离子交换树脂型号对照表396

(四)葡聚糖凝胶的某些技术数据397

(五)聚丙烯酰胺凝胶的技术数据397

(六)琼脂糖凝胶的技术数据398

(七)各种凝胶所允许的最大操作压398

十五、硫酸铵饱和度的常用表399

十六、测压法常用物理常数表400

十七、放射性测量单位401

十八、离心机转数(rpm)与相对离心力(RCF)的换算402

十九、试剂的配制及一些常用数据表403

(一)一般注意事项403

(二)常用数据表404

1.元素的原子量表404

2.常用酸碱百分浓度、比重和当量浓度的关系406

3.实验室中常用酸碱的比重和浓度的关系407

4.常用固态化合物的当量浓度(或克分子浓度)配制参考表407

6.常用基准物质的干燥温度和应用范围408

5.一些常用化合物的溶解度(20℃)408

7.某些有机溶剂的主要物理常数409

二十、一些常用单位409

(一)长度单位409

(二)体积单位410

(三)重量单位410

(四)摩[尔]数与摩[尔]浓度表示法410

(五)十进位数量词头及符号411

二十一、一些重要的生物化学期刊及手册411

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