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第一篇概 况1

第一章细胞、组织和器官保存的一般原理1

第一节研究方法1

一、整体人或动物的研究1

目 录1

二、分离器官的灌注法的研究2

三、组织和细胞培养技术2

四、细胞、组织和器官的保存技术2

（一）保存液2

（二）保存温度4

（三）金属容器和搪瓷容器6

（二）-80℃保存容器6

（一）4℃保存容器6

二、保存容器6

五、器官和组织切片技术6

（二）塑料容器6

（一）玻璃容器6

一、盛物容器6

第二节保存容器6

（三）-196℃保存容器7

第二章细胞形态的生化7

（二）蛋白质8

（一）核酸8

第一节细胞核8

一、细胞核的化学成分8

二、染色质和染色体10

（一）脱氧核糖核酸（DNA）10

（二）核糖核酸（RNA）10

（三）蛋白质10

三、核仁10

四、核液10

第二节线粒体11

一、线粒体的结构11

二、线粒体的化学组织11

一、微粒体12

二、内质网12

三、线粒体的功能12

和核蛋白体12

第三节微粒体、内质网、高尔基复合体12

三、高尔基复合体13

四、核蛋白体13

（一）核蛋白体的化学组成13

（二）核蛋白的结构及亚基13

第四节溶酶体14

一、溶酶体中的酶类14

二、溶酶体的功能14

一、微管15

第六节上清部分（胞液）15

第五节过氧化物酶体15

三、影响溶酶体膜的因素15

二、微丝16

第七节质膜16

一、质膜的化学组成与结构16

二、质膜的功能17

第八节细胞器的相互关系18

第二篇细胞的保存20

第三章概况20

一、冷冻损伤的机制20

（二）使用低温保护剂21

（一）采用适宜的冷冻和加温操作规程21

二、防止细胞在冷冻时损伤的方法21

三、今后的研究方向22

四、细胞的保存23

第四章单细胞的保存23

第一节精子的保存23

一、引言23

二、精子的保存方法24

三、保存后的精子妊娠效果24

第二节卵细胞保存24

第三节肿瘤细胞保存25

（二）试剂配制26

（一）培养容器26

一、原代细胞的培养26

第四节单细胞及二倍体细胞培养和保存26

（三）原代细胞培养27

二、细胞传代培养27

三、成片细胞的维持28

四、细胞的保存28

（一）细胞保存的意义28

（二）细胞的保存方法28

第五章血细胞的保存29

第一节红细胞的保存29

一、红细胞数量、结构和功能29

（一）红细胞膜30

（二）血红蛋白31

二、红细胞的化学组成34

三、红细胞代谢39

（一）红细胞的代谢能力39

（二）成熟红细胞的代谢特征40

（三）影响红细胞代谢的因素50

（四）葡萄糖代谢的酶53

（五）其它酶系55

（六）葡萄糖以外的能源底物之应用58

四、红细胞中阳离子（K+和Na+）的转运及红细胞膜的透过性59

五、红细胞的溶血（溶解作用）60

六、载体转运61

七、红细胞在呼吸气体运输中的功能62

（一）呼吸气体的运输62

（二）影响红细胞带氧能力的因素65

八、红细胞的保存72

（一）液体保存法（4℃保存）72

（二）低温和超低温保存法73

第二节白细胞的保存76

一、白细胞代谢的特点76

（一）白细胞代谢的一般概况76

（二）白细胞的能量代谢76

（三）脂类代谢80

（四）核酸代谢81

（五）蛋白质代谢82

二、粒细胞吞噬作用的生化84

（六）其他84

（一）粒细胞溶酶体的成分及其作用85

（二）粒细胞的杀菌作用机理85

三、细胞的免疫生化86

（一）移动抑制因子86

（二）淋巴毒素86

（三）趋化因子87

（四）有丝分裂因子87

（五）通透性因子87

（六）转移因子87

（七）干扰素87

四、白细胞的保存89

（一）血小板的结构90

一、血小板的结构和功能90

（）颗粒细胞的冰冻保存法90

（二）淋巴细胞的冰冻保存法90

第三节血小板的保存90

（二）血小板的功能92

二、血小板代谢95

（一）血小板代谢的概况95

（二）血小板代谢96

（三）血小板代谢和功能之间的关系97

三、血小板的保存97

（一）血小板的制备97

（二）血小板的保存97

一、引言98

第四节骨髓的保存98

二、骨髓移植的途径99

（一）自家骨髓移植99

（二）同基因型骨髓移植99

（三）同种异体骨髓移植99

（四）异种骨髓移植99

三、人休骨髓的采集99

四、人体骨髓的移植法100

五、人体骨髓的保存100

（一） 4℃保存100

（二）低温冰冻保存100

七、骨髓移植的副作用和并发症102

六、骨髓的临床应用102

八、骨髓的质量检定——活性鉴定103

第五节干细胞的保存105

第六节鞣化致敏红细胞的保存105

第六章胚胎的保存106

一、引言106

二、保存的方法106

第一节表皮的代谢107

一、表皮的糖代谢107

（一）糖的分解代谢107

第七章皮肤的保存107

第三篇组织的保存107

（二）糖的合成代谢108

二、表皮的脂类代谢108

（一）体表脂膜109

（二）表皮的正常脂类代谢109

第二节皮肤的保存110

一、引言110

二、保存方法110

（一）零上4℃保存110

（二）低温冰冻保存111

三、皮肤内琥珀酸脱氢酶活性的定量测定法114

第八章骨的保存115

第一节骨的代谢115

一、骨的组成116

二、骨的生成118

三、骨的吸收119

四、骨的重建119

第二节骨胳的保存119

一、概况120

二、骨胳的真空干燥保存120

三、冻干骨的临床应用121

第九章血管的保存121

一、引言121

二、生物血管（牛血管）的保存121

二、代谢和营养122

一、角膜的有机化学组成122

第一节角膜的生化122

第十章角膜的保存122

（一）葡萄糖的供给123

（二）氧的供给和消耗123

（三）乳酸和二氧化碳的清除123

三、渗透性124

四、透明度124

五、伤口愈合作用124

六、角膜的血管新生124

第二节角膜的保存125

一、引言125

二、国外角膜保存概况125

（一）年龄126

（二）死亡原因126

三、国内角膜保存概况126

四、移植材料的采取和选择126

（三）眼的病理127

（四）死亡时间127

（五）眼球处理127

五、角膜的保存127

（一）板层移植材料的保存127

（二）穿透移植材料的保存128

六、角膜内皮活性评定的方法131

（一）生物显微镜检查131

（二）电镜检查法131

（三）锥蓝和丽丝胺绿染色131

（六）角膜内皮显微镜132

（四）组织化学酶染色132

（五）温度逆转试验132

第四篇 器官的保存133

第十一章器官移植和保存的概况133

第一节器官移植的概况133

一、同种异体器官移植的基本概念133

（一）组织相容性抗原133

（二）人体白细胞抗原系统（HLA）的遗传性136

（三）组织配型相容性测定137

（四）同种供体器官的灌注与保存138

（五）免疫抑制药物应用138

（一）国外器官移植概况141

二、同种异体器官移植的意义141

（二）国内器官移植概况145

第二节器官保存的概况146

一、概况146

二、国外器官保存概况146

三、国内器官保存概况147

第十二章肾脏的保存147

第一节肾脏的生化147

一、尿液的生成与肾功能测定的原理及意义148

（一）尿液的生成148

（二）肾脏对某些物质的清除作用150

（一）肾脏的排泄机理及水、电解质平衡152

二、肾脏在维持内环境恒定上的作用152

（二）肾脏在调节酸碱平衡中的作用153

（三）非电解质的重吸收与排出156

第二节肾脏的保存157

一、引言157

（一）国外肾脏保存概况157

（二）国内肾脏保存概况163

二、肾脏的保存163

（一）肾脏保存的意义163

（二）肾脏保存的方法164

（三）灌注保存时影响肾功能的因素189

（四）延长低温保存期对肾组织的影响189

（五）肾脏在长期保存中所存在的问题190

（六）输血对肾移植存活率的影响191

（七）肾脏保存的质量检查192

（八）结尾195

第十三章肝脏的保存195

第一节肝脏的生化195

一、肝脏的结构与化学组成的特点195

（一）肝脏结构的特点195

（二）肝脏化学组成的特点196

二、肝脏在物质代谢中的作用197

（一）肝脏在糖代谢过程中的作用197

（二）肝脏在脂类代谢中的作用217

（三）肝脏在蛋白质代谢过程中的作用232

（四）肝脏在维生素代谢中的作用234

（五）肝脏在激素代谢中的作用234

第二节肝脏的保存235

一、引言235

（一）国外肝脏保存的概况235

（二）国内肝脏保存的概况236

二、肝脏的保存236

（一）概况236

（二）肝脏在零上（2～6℃）温度保存237

（三）肝脏在低温下的冰冻保存243

（四）用高渗细胞内溶液保存肝脏的作用机制的研究243

（五）肝脏在保存过程中所存在的问题245

（六）肝脏保存体外质量检查指标246

第一节心脏的生化247

一、无氧糖酵解与有氧糖酵解247

（一）糖酵解途径247

第十四章心脏的保存247

（二）糖酵解的控制248

（三）糖原的生成和分解251

（四）有氧糖醇解255

二、氧化代谢256

（二）三羧酸循环中乙酰－CoA的氧化259

（三）还原型NADH从胞浆到线粒体的转运261

（四）氧化磷酸化263

（五）能量平衡264

（六）氧化磷酸化的机制265

（七）氧化磷酸化控制266

（八）糖酵解和呼吸的整合267

（九）控制心脏产能的总体现268

三、能量的贮存和利用268

第二节心脏的保存269

一、引言269

二、心脏的保存270

（一）心脏在零上温度（4～10℃）的保存270

（二）心脏在低温下冰冻保存271

第十五章肺的保存273

第一节肺的生化273

三、脂质代谢和肺泡表面活性物质274

二、蛋白质代谢274

一、糖代谢274

第二节肺的保存275

一、引言275

二、肺的保存275

（一）单次低温液灌流保存275

（二）连续低温脉冲灌洗保存276

（三）低温非脉冲灌洗保存277

（四）低温高压氧277

三、缺血对肺功能的影响277

（一）肺对非低温缺血的耐受程度278

（二）对非低温或低温缺血的功能肺的反应278

第十六章胰腺和胰岛的保存280

第一节胰腺的保存280

一、引言280

二、胰腺的保存281

（一）胰腺在零上温度（4～10℃）的保存281

（二）胰腺在低温下的冰冻保存283

第二节胰岛细胞的保存285

一、供体胰岛组织的制备285

（一）大鼠胰岛的分离285

（二）成年人胰岛分离285

（三）胚胎胰腺285

（二）胰岛细胞在低温下的冰冻保存286

（一）胰岛细胞在零上温度（4～10℃）的保存286

二、胰岛细胞的保存286

（一）脂肪酸代谢287

第三节胰岛细胞和胰腺组织的培养技术288

一、胰岛细胞的培养288

（一）实验动物胰岛细胞的培养288

（二）胚胎胰岛的组织培养290

（三）人胰岛细胞的培养290

二、人体胰腺节段组织的培养290

第四节胰岛移植291

一、实验性胰岛移植291

（一）胚胎移植研究291

二、胰岛移植的临床研究292

（一）胰岛异体移植292

（三）大动物胰岛移值研究292

（二）啮齿类胰岛移植研究292

（二）胰岛自体移植293

第十七章小肠的保存293

一、小肠在零上（4～6℃）温度保存293

二、小肠在零下温度的保存294

第五篇血液代用品295

第十八章血液代用品在细胞、组织和器官保存中的应用295

第一节血液代用品应用概况295

五、小肠保存296

四、肾脏保存296

（二）保存296

（一）分离296

三、白细胞和血小板的分离和保存296

（一）在4℃的分离和保存296

二、红细胞分离和保存296

一、全血保存296

（二）在－196℃液氮中保存296

六、心脏保存297

第二节国内外血液代用品的概况（类型、性能）297

一、晶体盐类溶液297

（二）血清注射液298

（三）血浆注射液298

（四）血清白蛋白溶液298

（一）全血注射液298

二、含人血成分的血液代用品298

（五）血红蛋白299

（六）多种血浆蛋白溶液300

三、含异种蛋白的血液代用品300

（一）以动物血液成分制成的蛋白溶液300

（二）明胶溶液300

四、含植物胶体的血液代用品301

（一）植物糖类301

（二）植物蛋白302

五、含合成胶体的血液代用品302

（一）右旋糖酐302

（二）聚乙烯吡咯烷酮（PVP）溶液303

六、蛋白质水解产物和脂肪乳剂304

（一）蛋白质水解产物304

（三）聚乙烯乙醇溶液304

（二）脂肪乳剂305

七、人工血或称带氧血液代用液306

（一）人工血红蛋白306

（二）人工细胞306

（三）全氟碳化合物乳剂307

第三节血液代用品的临床应用308

一、防治失血性休克308

二、治疗感染性休克309

三、治疗某些心血管疾病309

四、用作心肺机的预充剂309

七、血液代用品的副作用310

第四节结语310

六、其他用途310

五、烧伤补液310

附 录312

一、基础试剂312

二、细胞培养液319

三、本书引用的略号321

四、糖酵解酶英汉名称对照表322

五、核苷酸及其衍生物的一些物理常数322

六、氨基酸的一些物理常数330

七、常用缓冲液的配制331

八、离心机转数（RPM）与离心力（G）的换算336

九、本书常用度量衡337

参考文献338