《图解扫描电子显微镜 生物样品制备》求取 ⇩

1.扫描电子显微镜的基础 永谷隆1

1.1 概论1

1.2 各种显微方式的比较2

1.3 扫描电镜的原理3

a. 电子束的聚集4

b. 扫描和扫描电镜的放大倍数4

1.4 扫描电镜的结构5

a. 镜体5

b. 样品室5

c. 真空系统6

d. 二次电子检测器6

1.5 扫描电镜的分辨力7

e. 显示部分(图像显示和摄影)7

a. 扫描探针的形成8

b. 图像的反差和噪音9

c. 电子束和样品的相互关系10

d. 在扫描电镜样品上电流的出入关系12

1.6 扫描电镜图像的形成13

a. 倾斜角效应和反差14

b. 边缘效应15

c. 原子序数效应-组分效应15

d. 由二次电子形成的组分反差16

e. 样品的凹凸不平和扫描电镜的反差16

f. 焦点深度17

g. 物镜光阑的选择18

h. 加速电压效应19

i. 反向电子图像21

j. 阴极荧光图像22

参考文献23

2. 离分辨扫描电子显微镜 永谷隆26

2.1 场发射型扫描电子显微镜26

2.2 以二次电子和反向电子之差做为信号的方式27

2.3 低损失(low-loss)反射电子方式29

2.4 工作距离WD--D方式30

2.5 使用强磁物镜的方式(透射/扫描方式等)32

参考文献33

3. 扫描电子显微镜的实践 永谷隆34

3.1 扫描电子显微镜的操作法34

a. 电镜的启动34

c. 观察图像的操作方法35

b. 样品的安装(以及更换)35

d. 反差和亮度的调整38

e. 放大倍数和扫描速度40

f. 摄影43

g. 小结--怎样摄好扫描电镜图片45

3.2 扫描电子显微镜图像的毛病45

a. 扫描电镜图像毛病的原因和内容46

b. 损伤48

c. 污染50

d. 放电52

3.3 保养时的注意事项53

a. 镜体的保养53

c. 显示器部分的保养54

b. 闪烁体的保养54

d. 真空系统的保养55

3.4 扫描电子显微镜的安装条件55

3.5 小结56

参考文献56

4. 生物样品制作法57

4.1 概论 田中敬一57

4.2 观察面的剖出法 田中敬一60

a. 表面观察法60

b. 割断法61

(1)树脂割断法62

(2)有机溶媒割断法66

(3)水溶性包埋剂割断法69

(4)其他割断法70

c. 剥离法73

(1)Vial的方法73

(2)Boyde的方法74

(3)田中等的方法74

d. 其它方法75

(1)游离细胞及其割断法75

(2)和光镜、透射电镜图像的对比78

(3)使用胶原酶的剖出法80

参考文献81

4.3 样品干燥法 田中敬一82

a. 临界点干燥法83

(1)临界点干燥法的步骤和方法83

(2)临界点干燥法的理论90

(3)临界点干燥法使用的装置93

(4)临界点干燥时样品的收缩94

(5)中间液94

(6)失败的原因95

b. 冷冻干燥法97

(1)弗立昂TF冷冻干燥法97

(2)酒精冷冻干燥法97

(3)乙腈真空干燥法99

c. 对位二氯苯(paradichlorbenzene)干燥法100

参考文献100

4.4 导电法100

a. 金属镀膜法 永谷隆101

(1)真空喷镀法103

(2)溅射镀膜法 永谷隆、赤堀宏106

(3)其他金属镀膜法 永谷隆113

参考文献114

b. 导电染色法 村上宅郎114

(1)概论114

(2)单宁镀酸法114

(3)镀酸·珠叉二肼法119

(4)铂·水合肼法以及其他方法120

(5)用于导电染色的微形样品载物台120

(6)用玻璃纸或滤纸做的微小样品载物台122

(7)附记122

(2)湿性化学法123

(1)放电防止液123

(3)电子透过法123

参考文献123

c. 其它方法 永谷隆123

参考文献124

4.5 离子蚀刻法 永谷隆124

参考文献126

5. 铸型观察法 村上宅郎、大谷修127

(1)概论127

(2)甲基丙烯酸酯注入剂的配制127

(3)注入剂的粘度检查128

(6)注入脏器和灌流130

(7)树脂的注入和硬化130

(5)向注入的树脂中添加硬化剂130

(4)Mercox注入剂130

(8)腐蚀和清洗131

(9)铸型的细切和导电处理131

(10)扫描电镜观察和显微解剖131

(11)向血管以外的管道中注入树脂132

(12)印在铸型表面上的结构132

(13)胶乳注入133

(14)胶乳法和丙烯酸酯法的比较133

参考文献133

6. 免疫扫描电子显微镜法 天见和畅、梅田昭子134

a. 免疫扫描电镜法134

b. 免疫扫描电镜法的标记物134

(1)与透射电镜的区别134

(2)扫描电镜标记物的条件134

(3)目前应用的标记物135

(1)标记物的精制139

c. 免疫扫描电镜法的实际操作139

(2)抗体γ-球蛋白的精制140

(3)抗体和标记物的结合140

(4)其它抗体与标记物结合法141

(5)用标记抗体对样品进行处理143

参考文献143

7. 冷冻扫描电子显微镜法 德永纯一144

a. 冷冻扫描电镜法的基本步骤144

(1)样品冷冻法144

(2)向扫描电镜镜筒中送入冷冻样品147

b. 用冷冻扫描电镜对双重割断面的观察法147

(1)在霉菌类孢子形态学上的应用148

c. 冷冻扫描电镜在生物学上的应用148

(2)在动物组织学上的应用153

d. 冷冻样品表面的金属镀膜157

e. 冷冻扫描电镜的图像质量及其分辨本领，特别是和过去的扫描电镜比较161

f. 冷冻扫描电镜法的将来发展164

参考文献165

补遗 永谷隆166

8. 扫描电子显微镜图像的立体观察 藤田恒夫、安逮一男167

a. 立体观察及其在扫描电镜上的应用价值167

b. 扫描电镜立体图片的摄制方法168

c. 立体观察的方法170

参考文献171

a. 扫描电镜图像电影化的意义172

b. 摄制电影的方法172

9. 扫描电子显微镜图像的电影化 藤田恒夫、安逮一男172

c. 使图像活动的方法和技术178

(1)倾斜178

(2)连续放大和缩小(急速变焦)178

(3)水平移动178

(4)其他178

参考文献179

10. 微区分析法 永谷隆180

a. 原子的激发和缓解180

b. 特征X射线的特性182

c. 波长散射型X射线微区分析法(WDX)182

d. 能量散射型X射线微区分析法(EDX)188

e. EDX和WDX的比较191

f. 分析电镜法192

g. 扫描透射电镜(STEM)193

h. 电子能量损失的分析法(ELS)194

i. 扫描俄歇电子分光法(SAM)194

参考文献196

11. 染色体观察法 饭野晃啓197

参考文献200

12. 显微解剖 村上宅郎201

参考文献202

13. 彩色扫描电子显微镜法 田中敬一203

参考文献205

14. 扫描电子显微镜的应用206

(1)细胞的割断面I 名黑知德206

(2)细胞的割断面II 松本行雄208

(3)核与内质网 田中敬一、饮野晃启、名黑知德210

(4)人的染色体 饭野晃啓212

(5)粗面内质网 田中敬一、古沢正治214

(6)线粒体I 益永恭光、长武均216

(7)线粒体II 益永恭光、长武均218

(8)高尔基复合体 本濑照康、鹿岛让220

(9)分泌颗粒 田中敬一、名黑知德222

(10)骨骼肌纤维 沢田元224

(11)枯否氏星形细胞 长武均226

(12)肥大细胞 福留初子228

(13)培养细胞 大西礼子、金刚惠230

(14)单层圆柱状上皮细胞 沢田元232

(15)喉头粘膜上皮 大山胜234

(16)周皮细胞 岛田逮生、杉田新236

(17)肌上皮 村上正浩238

(18)嗅上皮 大山胜240

(19)晶状体纤维 田中敬一、福留初子242

(20)末梢神经 阿藤孝二郎244

(21)血志中的纤维蛋白网 板仓宰246

(22)癌性腹膜症患者的肠系膜浆膜细胞 喜安佳人248

(23)胃癌的腹膜播散性转移病灶 喜安佳人250

(24)遗传性球状红细胞症的脾脏 有马栄德252

(25)蛔虫 宇仁茂彦254

(26)酵母细胞 大隅正子256

(27)莲丝 大隅正子、山田真子258

(28)免疫扫描电镜法的应用I 公文裕已260

(29)免疫扫描电镜法的应用II 公文裕已262

(30)X射线微区分析法的应用 牧田登之264

索引266