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1.1 现代分离的一些方法1

第一章色谱法的基本类型1

1.2 按照分离过程原理的色谱经典分类法9

1.2.1 吸附色谱法10

1.2.2 分配色谱法11

1.2.3 离子交换色谱法12

1.2.4 凝胶色谱法13

1.2.5 生物亲和色谱法14

1.3 按照展开程序的色谱分类法15

1.3.1 迎头分析法15

1.2.6 色谱法的其它类型15

1.3.2 顶替色谱法17

1.3.3 洗脱色谱法18

1.3.4 按照分离方法的其它一些分类法20

1.4 按照两相间产生分级分离过程的现代色谱分类法22

1.4.1 液相色谱法22

1.4.2 气相色谱法22

1.5 其它型式的色谱分类法23

参考文献24

第二章色谱法的理论26

2.1 引言26

2.2.1 色谱系统中溶质的质量平衡27

2.2 色谱分离过程的一般描述27

2.2.2 理想线性色谱法的模型31

2.2.3 保留方程式32

2.3 非理想线性色谱模型的理论描述33

2.3.1 色谱区带的扩散33

2.3.2 理论塔板的概念35

2.4 流动相的流动36

2.5 吸附平衡和分配常数38

2.6 色谱分辨率40

参考文献41

3.1 引言43

第三章纸色谱法43

3.1.1 色谱用纸44

3.1.2 纸色谱法用的设备46

3.1.3 溶剂的选择55

3.1.4 RF和RM的定义及其测量和使用62

3.2 工作程序67

3.2.1 样品的制备67

3.2.2 点样71

3.2.3 色谱图的处理及其展开71

3.2.4 干燥75

3.2.5 检测76

3.2.6 斑点的洗脱77

3.2.7 色谱图的贮存和归档78

3.3 制备纸色谱法78

3.4 定量纸色谱法79

3.5 含氧有机化合物的纸色谱法80

3.5.1 醇类81

3.5.2 糖类83

3.5.3 醛和酮88

3.5.4 酸类89

3.5.5 酚、黄酮类、香豆素93

3.5.6 甾族化合物和萜类化合物95

3.5.7 其它含氧化合物97

3.6 含氮有机化合物的纸色谱法99

3.6.1 氨基酸和肽的纸色谱法99

3.6.2 核酸组分104

3.6.3 生物碱105

3.6.4 吲哚107

3.6.5 胺109

3.6.6 硝基化合物111

3.7 含其它杂原子的物质的纸色谱法111

3.7.1 含硫化合物111

3.7.2 含磷有机化合物113

3.8 维生素113

3.9 抗菌素115

3.10 其它有机化合物116

3.11 无机化合物的纸色谱法117

311.1 阳离子的分离与检测实例119

3.11.2 阴离子的分离和检测实例121

3.12 纤维素柱122

参考文献123

第四章吸附柱色谱法127

4.1 引言127

4.2 吸附剂128

4.2.1 一般特性128

4.2.2 硅胶133

4.2.3 氧化铝137

4.2.4 硅酸镁、合成硅酸镁载体141

4.2.5 氧化镁141

4.2.6 碳142

4.2.7 聚酰胺142

4.2.8 聚苯乙烯吸附剂146

4.2.9 高压液相色谱法(HPLC)用的吸附剂147

4.2.10 吸附剂上的反应152

4.3 流动相154

4.4 色谱法技术158

4.4.1 原理和操作方法的选定158

4.4.2 柱体及填料159

4.4.3 洗脱系统的选择161

4.4.4 色谱操作程序和结果评定163

4.5 有机物柱吸附色谱法的实例167

4.5.1 石油醚中倍半萜烯物的分离167

4.5.2 在惰性气体中进行物质的萃取和色谱分离168

4.5.3 在一根离子交换剂银盐柱上的银化色谱法170

4.5.4 用氧化镁分离类胡萝卜素甙174

4.5.5 在非极性吸附剂AmberliteXAD-2上用洗脱色谱法作类咕啉(Corrinoids)的分离175

4.5.6 在经典的和薄壳吸附剂上的高压液-固色谱法176

4.5.7 制备高压液相色谱法180

4.5.8 使用化学键合固定相的高压液相色谱法182

参考文献189

第五章离子交换色谱法192

5.1 引言192

5.1.1 离子交换剂的本质192

5.1.2 离子交换剂根据它的来源和载体骨架的化学组成的分类193

5.1.3 离子交换剂按离化基团的分类193

5.1.4 按形状和状态的分类196

5.2 离子交换剂的构造199

5.2.1 无机离子交换剂199

5.2.2 离子交换树脂201

5.2.3 离子交换纤维素204

5.2.4 葡聚糖和琼脂糖的离子交换衍生物205

5.2.5 其它类型的离子交换材料206

5.2.6 粒状离子交换剂的物理结构206

5.3 吸收过程的本质207

5.3.1 离子交换207

5.3.2 伴随离子交换而发生的各种过程209

5.3.3 两性离子的吸着作用210

5.4 离子交换色谱法的原理211

5.4.1 低分子物质的色谱法211

5.4.2 蛋白质的色谱法213

5.5.1 交换容量214

5.5 离子交换剂的基本特性214

5.5.2 滴定曲线215

5.5.3 密度和溶胀度216

5.5.4 颗粒的大小和形状218

5.6 色谱分离前离子交换剂的准备、再生和贮存219

5.6.1 适宜离子交换剂的选择219

5.6.2 倾析和溶胀221

5.6.3 实验室中按颗粒大小分级221

5.6.4 离子交换剂的循环转型237

5.6.5 缓冲剂的选择及离子交换剂的缓冲液处理238

5.6.6 离子交换剂的再生和贮存240

5.7.1 色谱柱及其容量241

5.7 色谱法241

5.7.2 离子交换剂柱的填充和平衡243

5.7.3 加样244

5.7.4 洗脱方法及其速度245

5.7.5 馏分的大小及控制247

5.7.6 各种色谱柱参数的换算248

5.8 用离子交换剂分离无机物质混合物的实例249

5.8.1 非色谱性应用249

5.8.2 阳离子色谱法252

5.8.3 阴离子色谱法253

5.8.4 来自络盐溶液和混合溶剂的离子交换255

5.9 有机化合物的分离实例259

5.9.1 强离解离子交换剂的色谱法260

5.9.2 用改良结构离子交换剂的色谱法263

5.9.3 用聚合吸附剂的色谱法266

5.10 离子交换剂在生物化学中的应用267

5.10.1 氨基酸270

5.10.2 肽类275

5.10.3 蛋白质281

5.10.4 微生物胞壁碎片的分离283

5.10.5 抗菌素286

5.10.6 维生素289

5.10.7 碱基、核甙、核甙酸和核酸291

参考文献297

第六章凝胶色谱法304

6.1 引言304

6.1.1 凝胶色谱法的原理304

6.1.2 定义和基本术语305

6.2 色谱用凝胶308

6.2.1 对凝胶的要求308

6.2.2 葡聚糖凝胶310

6.2.3 聚丙烯酰胺凝胶313

6.2.5 琼脂糖凝胶317

6.2.4 羟烷基丙烯酸酯凝胶317

6.2.6 其它凝胶320

6.3 凝胶色谱法的实验技术324

6.3.1 仪器、柱体、联接管和流速调节324

6.3.2 凝胶的选择327

6.3.3 准备工作328

6.3.4 柱子尺寸、样品量及流速332

6.3.5 加样332

6.3.6 上行凝胶色谱法334

6.3.7 填充材料的再生334

6.3.8 凝胶的贮存335

6.3.9 微生物感染的防止335

6.4.1 色谱柱的串联连接336

6.4 增加有效柱高336

6.4.2 循环色谱法337

6.4.3 间断循环色谱法337

6.5 实验结果的计算339

6.6 凝胶色谱法的应用340

6.6.1 脱盐和组分离341

6.6.2 混合物的分级分离342

6.6.3 分子量的测定346

参考文献350

7.1 引言352

第七章亲合色谱法352

7.1.1 固相载体的选择354

7.1.2 亲合剂的选择和结合355

7.1.3 吸附和洗脱的条件359

7.2 亲合色谱法的固相载体359

7.2.1 葡聚糖和它的衍生物359

7.2.2 亲合剂与琼脂糖连接的方法和其改进362

7.2.3 聚丙烯胺和羟烷基甲基丙烯酸酯凝胶367

7.2.4 纤维素和它的衍生物372

7.2.5 其它载体373

7.3 供应结合了亲合剂的固相载体377

7.4.1 应用琼脂糖衍生物的亲合色谱法379

7.4 应用379

7.4.2 在偶联半抗原的Bio-Gelp-6上细胞的亲合色谱法382

7.4.3 纤维素衍生物的亲合色谱法383

参考文献386

第八章柱液相色谱法的自动化和机械化389

8.1 引言389

8.2 流动相贮存器和液路联接390

8.3 阀和泵391

8.3.1阀391

8.3.2泵392

8.4.1 梯度发生装置395

8.4 梯度发生器和程序控制装置395

8.4.2 完全程序化402

8.5 进样装置、注射器和色谱柱403

8.5.1 进样装置和注射器403

8.5.2 色谱柱的类型405

8.5.3 色谱柱的填充406

8.6 检测器407

8.7 数据的记录和计算413

8.8 流量计和馏分收集器416

8.9 更复杂的系统及综合自动化的举例418

参考文献420

9.1 引言422

第九章薄层色谱法422

9.2 薄层色谱仪器423

9.2.1 板、涂布器、制层423

9.2.2 展开槽、喷显箱427

9.3 薄层色谱法用固定相431

9.3.1 硅胶431

9.3.2 氧化铝434

9.3.3 硅酸镁436

9.3.4 聚酰胺436

9.3.5 纤维素437

9.3.6 离子交换剂438

9.3.7 凝胶色谱法用的载体440

9.3.8 其他类型的吸附剂441

9.4 薄层色谱法用洗脱液441

9.5 薄层色谱法的操作步骤443

9.5.1 点样443

9.5.2 洗脱液的选择和展开法444

9.5.3 检测448

9.6 定量测定449

9.7 制备薄层色谱法451

9.7.1 层的制备451

9.7.2 点样451

9.7.3 色谱的展开452

9.7.4 检测453

9.7.5 组分从层上离析下来453

9.7.6 制备薄层色谱法的优点453

9.7.7 干柱色谱法453

9.7.8 薄层色谱法的工作条件往柱色谱上推导454

9.8 薄层色谱法的应用举例455

9.8.1 在浸渍Ag+盐的硅胶上分离烯烃455

9.8.2 棕榈油甘油三酸酯的分离和定量分析456

9.8.3 16种氨基酸在离子交换箔上的单向分离457

9.8.4. 用凝胶色谱法测定分子量458

9.8.5 四环系抗菌素的分离460

9.8.6 妊娠甾族化合物的分离461

9.8.7 在氧化铝上分离无机阴离子461

9.8.9 在纤维素薄层上单糖和低聚糖的分离463

9.8.10 在薄层上用分配色谱法分离结构很相似的青霉素464

9.8.11 生育酚的定量分析464

9.8.12 用薄层色谱法分离长春花碱、长春新碱、环氧长春碱和异长春碱465

9.9 用于纸色谱法和薄层色谱法的主要检测试剂465

9.8.8 反相薄层色谱法之后,异戊(间)二烯醌的非破坏性观察法467

参考文献475

10.1.1 气相色谱法的发现478

10.1.2 气相色谱法的理论基础478

10.1 引言478

第十章气相色谱法478

10.2 仪器488

10.2.1 载气490

10.2.2 进样490

10.2.3 色谱柱492

10.2.4 恒温箱492

10.2.5 检测器493

10.2.6 色谱记录仪501

10.3.1 固定相506

10.3 预备阶段506

10.3.2 固定相裁体509

10.3.3 色谱柱的制备512

10.3.4 毛细管柱的涂渍513

10.3.5 样品的调整515

10.4 定性分析516

10.4.1 根据保留特性进行组分鉴定517

10.4.2 相对保留值和保留指数521

10.4.3 选择性检测器524

10.4.4 气相色谱与质谱和其它光谱法的直接联用529

10.5 定置分析531

10.5.1 误差的来源531

10.5.2 色谱曲线的评价532

10.5.3 不完全分离峰的测定534

10.5.4 色谱图的定量评价535

10.6 程序控制538

10.6.1 使用的理由538

10.6.2 技术和应用539

10.7 气相色谱法的其它用途541

10.7.1 吸着等温线的测定541

10.7.2 吸附热的测定542

10.7.3 吸附剂表面积的测定543

10.7.4 热解色谱法545

10.7.5 用气相色谱法作痕量分析549

10.8.1 在环境里起重要作用的某些物质和气体的分析552

10.8 应用举例552

10.8.2 有机化学和生物化学样品的分析557

参考文献564

第十一章逆流分配法567

11.1 引言567

11.1.1 液-液萃取567

11.1.2 逆流分配法的原理568

11.1.3 分配系数569

11.2 非连续逆流分配法[克雷格法(Craig′s)]570

11.2.1 基本[克雷格(Craig)]程序570

11.2.2 逆流分配法的参数571

11.2.3 仪器575

11.3 逆流分配法的各种变化程序576

11.3.1 再循环程序577

11.3.2 单撤取程序法579

11.3.3 菱形分离法(平方法)579

11.3.4 双撤取法579

11.3.5 欧肯弗氏(O′keeffe′s)程序581

11.3.6 渡边-森岗(Watanabe-Morikawa)程序584

11.4 影响逆流分配的因素584

11.5 逆流分配法在分析方面的应用586

11.8.1 在20个管的仪器中富集复杂的反应混合物中的一个成分587

11.8 逆流分配技术的举例587

11.7 连续法587

11.6 制备性应用587

11.8.2 用全自动逆流分配仪分离纯的(2-0-甲基酪氨酸)催产素(甲基催产素-SPOFA)588

参考文献591

第十二章电泳法592

12.1 引言592

12.2 电泳595

12.2.1 在区带电泳和移动界面电泳条件下的离子迁移理论595

12.2.2 连续自由流动式电泳597

12.2.3 纸上区带电泳599

12.2.4 醋酸纤维膜区带电泳605

12.2.6 凝胶电泳607

12.2.5 薄层电泳607

12.2.7 浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳(P-G-E)610

12.2.8 不连续“盘状”聚丙烯酰胺凝胶电泳610

12.3 等速电泳618

12.3.1 等速电泳时的离子运动理论618

12.3.2 毛细管等速电泳621

12.3.3 制备等速电泳625

12.4 等电分级分离(聚焦)626

12.4.1 等电分级分离的理论626

12.4.2 液体介质中的等电聚焦627

12.4.3 聚丙烯酰胺凝胶中的等电聚焦电泳631

12.5 电源632

12.6 安全635

12.7 电泳法使用的实例636

12.7.1 配体缓冲体系中无机离子的区带电泳636

12.7.2 氨基酸和肽类的电泳639

12.7.3 蛋白质的电泳645

12.7.4 核酸及其碎片的电泳分离655

参考文献658

第十三章参考文献的评述661

13.1 引言661

13.2 杂志和其它期刊662

13.3 专著663

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