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目录1

第一章 亲和色谱法1

第一节 基本原理1

第二节 载体的选择2

一、琼脂糖凝胶2

二、聚丙烯酰胺凝胶3

三、葡聚糖凝胶3

二、配基上的化学基团4

一、配基与所要分离的生物高分子间的亲和力4

第三节 配基的选择4

四、多孔玻璃4

三、共价结合的配基5

四、疏水的配基5

第四节 亲和吸附剂的制备6

一、多糖类载体6

（一）溴化氰活化及偶联法7

（二）水溶性碳二亚胺的偶联作用8

（三）N－羟基琥珀酰亚胺活化酯的偶联作用8

（四）偶氮键的偶联作用9

（五）巯基琼脂糖10

（七）琼脂糖的酰肼衍生物11

（六）琼脂糖凝胶的多价“手臂”11

（八）双环氧活化法12

二、聚丙烯酰胺载体12

三、多孔玻璃载体13

第五节 吸附和洗脱13

一、吸附13

（三）氨乙基衍生物的制备13

（二）酰肼衍生物的制备13

（一）羧基衍生物的制备13

二、洗脱14

第六节 应用举例14

一、酶14

二、抗体及抗原15

三、结合蛋白和输送蛋白16

四、受体蛋白16

五、细胞及病毒16

六、刀豆球蛋白A和糖蛋白16

参考文献17

第一节 基本原理19

第二章 逆流分溶法19

第二节 实验23

一、仪器23

二、操作方法25

三、溶剂系统27

第三节 操作30

第四节 分溶曲线的绘制32

第五节 数据处理33

参考文献33

一、粘度的定义35

二、泊稷叶定律35

第三章 粘度法35

第一节 基本原理35

三、各种粘度的定义与符号36

四、蛋白质溶液的粘度与浓度及温度的关系37

五、粘度与分子形状的关系37

六、特性粘度与分子量的关系39

七、非牛顿型粘度40

第二节 粘度计的结构与操作41

二、粘度的测定42

一、结构42

第三节 奥氏粘度计42

三、奥氏粘度计的变型43

第四节 水平式粘度计44

一、结构44

二、粘度测定及其注意之点45

第五节 毛细管粘度计的误差讨论46

一、动能校正46

二、尾端校正46

第六节 蛋白质溶液的配制及有关问题47

一、溶液的配制与稀释47

三、其他因素引起的误差47

二、蛋白质浓度的测定48

附录毛细管的选择48

第四章 光散射法49

第一节 基本原理49

第二节 仪器的装置及校验55

一、光源55

二、入射光束56

三、散射池和水池56

四、散射光束及散射光强测量系统56

六、仪器对称性的检验57

五、仪器的调整57

一、除尘58

第三节 实验及数据处理58

二、校正因子59

三、参比标准60

四、蛋白质折射率增量及溶液浓度的测定60

五、干涉仪的使用62

六、测定63

七、数据处理实例64

附表66

八、误差的估计66

参考文献67

第五章 高效液相色谱法68

第一节 引言68

第二节 基本原理69

一、溶质在色谱柱中的滞留69

二、色谱柱的选择性69

三、色谱柱的效率70

四、色谱分析的分辨率及其控制的一般原则70

一、输液泵73

第三节 主要设备73

二、加样系统74

三、色谱柱74

四、检测器76

第四节 流动相78

一、溶剂的物理性质78

二、溶剂的极性80

三、溶剂的选择性81

四、溶剂在使用前的处理82

二、液－固色谱法中流动相的选择83

一、吸附剂与溶质的相互作用83

第五节 液－固色谱法83

三、液－固色谱法的应用86

第六节 键合相色谱法86

一、正常相色谱法87

二、反相色谱法87

三、键合相色谱法的应用90

第七节 离子配对色谱法92

第八节 离子交换色谱法94

一、离子交换色谱的固定相95

二、离子交换色谱的流动相96

三、离子交换色谱的应用97

第九节 体积排阻色谱法98

第十节 色谱分析中的几个实际问题100

一、样品的制备100

二、固定相和流动相的选择102

三、色谱峰的鉴别104

四、色谱峰的定量分析105

参考文献107

第六章 气相色谱法110

第一节 引言110

第二节 气相色谱仪器装置111

一、载气112

二、进样113

三、色谱柱114

四、温度控制114

五、鉴定器115

六、记录器120

第三节 气相色谱原理121

一、线性气相色谱法121

二、保留值的测量122

三、塔板理论125

四、速率理论126

五、色谱峰的分离126

第四节 担体和固定液128

一、吸附剂128

二、担体129

三、多孔聚合物132

四、固定液133

五、色谱柱的填充和老化137

六、毛细管色谱柱140

第五节 定性和定量分析141

一、定性分析142

二、定量分析143

第六节 气相色谱法在生物化学中的应用146

一、脂类的分析147

二、糖的分析151

三、甾体化合物的分析157

四、尿香草扁桃酸和高香草酸的测定168

五、氨基酸的分析174

六、嘧啶、嘌呤和核苷的分析183

参考文献184