《组织学与组织化学技术》求取 ⇩

第一篇组织学技术的基本理论与技术2

第一章概论2

一、组织学技术的发展与应用2

二、组织制片方法分类2

第二章组织制片基本技术3

一、动物麻醉法3

二、动物取材3

（一）动物选择4

（二）组织取材的方法5

1．肌组织取材5

2．消化系统取材6

3．泌尿系统取材8

4．呼吸系统取材9

5．循环系统取材9

6．淋巴器官取材10

7．生殖系统取材11

8．神经系统取材11

9．特殊感官取材12

三、固定和固定液13

（一）固定的目的和意义13

（二）固定的方法14

（三）组织固定与温度的关系15

（四）固定应注意的几个问题15

（五）固定液15

单纯固定液16

1．福马林16

2．乙醇17

3．丙酮18

4．氯化汞18

5．重铬酸钾18

6．铬酸19

7．苦味酸19

8．锇酸20

9．醋酸21

10．三氯醋酸21

混合固定液21

1．甲醛混合固定液21

2．酒精混合固定液22

3．丙酮混合固定液22

4．氯化汞混合固定液23

5．重铬酸钾混合固定液23

6．铬酸混合固定液24

7．锇酸混合固定液25

8．苦味酸混合固定液26

9．三氯醋酸混合固定液27

10．改良固定液27

四、组织冲洗、脱水与透明28

（一）组织冲洗28

（二）组织脱水29

1．脱水剂29

2．脱水方法29

3．正丁醇脱水过程30

（三）组织透明31

五、组织渗蜡与包埋32

（一）渗蜡32

（二）包埋33

六、组织切片36

（一）切片机36

1．回转切片机36

2．滑动切片机36

3．冷冻切片机37

（二）切片刀37

（三）磨切片刀的器具及磨刀法37

1．磨刀器具37

2．人工磨刀法38

3．自动磨刀机技术38

（四）切片技术39

1．石蜡切片法39

2．石蜡切片常遇到的问题及解决的方法40

3．切片附贴41

（1）贴片剂和用具42

（2）贴片方法42

4．火棉胶切片法43

（1）火棉胶配法43

（2）火棉胶常规制片过程43

（3）快速火棉胶包埋法45

5．冰冻切片法46

（1）冰冻切片与切片机46

（2）氯乙烷冰冻切片法46

（3）二氧化碳冰冻切片法46

（4）半导体致冷器冰冻切片法47

（5）低温冷冻切片机切片法48

七、染料与染色48

（一）染色简史48

（二）染料分类与化学结构48

1．染料来源：天然染料48

（1）苏木精49

（2）胭脂红49

（3）地衣红49

2．人工合成染料50

（1）硝基类50

（2 ）亚硝基类50

（3）醌型苯环类50

（4）？叮染料类51

（5）醌亚胺染料类52

（6）偶氮染料类53

（7）蒽醌染料类55

（三）染料的性质55

1．发色团56

（1）酸性发色团56

（2）碱性发色团56

2．助色团56

3．染料与助色团的关系57

4．染料的应用58

5．染色的基本原理59

（1）染色的物理现象59

（2）染色的化学现象59

（3）染色的物理化学现象59

6．媒染剂促染剂和分化剂60

（1）媒染剂60

（2）促染剂61

（3）分化剂61

八、常规染色技术61

（一）苏木精的化学特性61

（二）各种苏木精染色液的配制63

1．Ehrlich氏苏木精63

2．Delafield氏苏木精63

3．Harri氏苏木精63

4．Mayer氏苏木精63

5．Co1e氏苏木精64

6．Carazzi氏苏木精64

7．Hansen氏苏木精64

（三）伊红y的化学特性65

（四）伊红y的？染剂和染色液65

（五）H、E染色的步骤和方法65

（六）常规H、E染色应注意的问题67

（七）整块组织H、E染色技术68

1．染色步骤和方法68

2．整块组织苏木精染色对不同组织时间的估计68

第二篇细胞与组织的特殊染色技术70

第一章细胞学特染技术70

一、马蛔虫卵或猪蛔虫卵巢显示细胞分裂方法70

1．Flemming's改良法70

2．Heiden hain's铁苏木精法71

二、植物细胞洋葱根显示细胞分裂方法71

三、染色体和中心体显示法72

四、线粒体特染技术73

（一）Regaud's线粒体染色法74

（二）Bensley's线粒体染色法75

（三）Altmann's线粒体显示法75

（四）Benda's线粒体显示法76

（五）线粒体Luxol快兰——焰红快染技术77

五、高尔基复合体显示法78

（一）Da—Fano's高尔基复合体显示法78

（二）Mcdonald's高尔基复合体改良法79

（三）Cajal's硝酸铀高尔基复合体显示法79

（四）高尔基复合体Elftman's直接浸银法80

（五）高尔基复合体锇酸浸银法81

六、动物淀粉显示方法81

（一）动物淀粉Best's卡红染色法82

（二）奥新兰动物淀粉染色82

（三）Langhan's碘显示糖元法83

第二章上皮组织特殊制片83

一、上皮剥离标本83

（一）鳞状上皮细胞甲基兰染色83

（二）柱状上皮细胞制片84

（三）假复层纤毛柱状上皮制片84

二、间皮——肠系膜铺片镀银法84

三、间皮细胞快速镀银法84

四、内皮细胞银染法85

五、表皮铺片显示细胞基膜染色法85

六、剥落上皮细胞EA36染色法86

第三章结缔组织染色86

一、纤维性结缔组织染色87

（一）疏松结缔组织纤维和细胞成分染色87

1．皮下组织H、E——地衣红染色法（台盘兰注射）87

2．皮下组织铺片地衣红——亮绿染色法88

3．肠系膜铺片特染法88

4．Heidenhain AzAn结缔组织染色法89

（二）纤维性结缔组织各种纤维成分染色90

弹性纤维90

1．Weigert's弹性纤维染色法90

2．弹性纤维Weigert改良Moore法91

3．醛复红弹性纤维染色法92

4．碱性兰B弹性纤维染色法92

胶元纤维93

1．Van Gie son's胶元纤维染色法93

2．Ma s son's三色染色法94

3．胶元纤维弹性纤维和肌纤维染色94

4．Van Gieson—orcein合并染色法（本室改良法）95

网状纤维96

1．Gordon和Sweet网状纤维染色法96

2．Foot's网状纤维镀银法96

3．Gomori's网状纤维显示法97

4．Humason's等网状纤维、胶原纤维及弹性纤维混合染色法97

5．本室改良网状纤维、胶元纤维和弹性纤维联合染色法99

6．网状纤维镀银法一览表100

（三）结缔组织细胞成分特殊染色法103

1．成纤维细胞铁苏木精染色103

2．组织细胞与成纤维细胞天青——伊红——瑞特氏染色法103

3．肥大细胞奥新兰——沙黄染色104

4．肥大细胞硫堇染色104

5．肥大细胞俾士麦褐染色法104

6．肥大细胞中性红染色法105

7．肥大细胞醛复红——奥新兰染色105

8．甲苯胺兰肥大细胞染色法105

9．浆细胞Lillie's天青A——伊红染色法106

10．浆细胞美兰—天青Ⅱ—焰红染色106

11．浆细胞Unna's多色性甲基兰染色107

12．浆细胞甲基绿——派喏宁染色法107

二、骨与软骨107

（一）骨磨片染色技术108

1．骨磨片空气封闭制片法108

2．骨磨片酸性复红染色法108

3．骨磨片镀银法109

4．骨磨片大力紫（或结晶紫）染色法109

（二）骨组织脱钙、切片及染色109

1．脱钙剂配制110

2．单纯脱钙液110

3．混合脱钙液111

4．硬骨组织的化学脱钙法111

5．骨组织电解脱钙法112

6．脱钙骨火棉胶包埋及切片方法112

7．脱钙骨切片特染113

（1）Schmorl's硫堇——苦味酸染色113

（2）Von Kossa's脱钙骨镀银法114

（3）Lorch's骨的硷性磷酸酶与磷酸盐显色法115

（三）软骨及骨发生特染技术115

1．软骨酸性复红——胺尼林兰——Weigert来复红染色116

2．透明软骨俾士麦褐—甲基绿染色116

3．弹性软骨地衣红——亮绿染色117

4．骨发生西素红S——多色性甲基兰染色117

5．软骨成骨与膜内成骨Koneff's染色法118

三、血液与骨髓118

（一）血液骨髓涂片技术119

（二）涂片的染色技术119

（三）血膜制片技术120

（四）血液骨髓常用染色方法120

1．Wright's染色法120

2．Giemsa's染色法121

3．Wright's与Giemsa's联合染色法122

4．May—Grüwald's血液骨髓染色法122

5．Schiff's——甲基兰123

（五）血液和骨髓切片染色技术123

1．血液切片May—Grünwald's液——伊红染色法123

2．骨髓切片德氏苏木精——天青——伊红染色法124

3．Wolbach's Gi emsa骨髓切片染色125

4．Barreff's骨髓切片染色法125

（六）网织红细胞与白细胞特殊染色126

1．网织红细胞煌焦油兰染色法126

2．网织红细胞煌焦油兰（或天青Ⅰ）枸椽酸钠染色法126

3．嗜碱性粒细胞甲苯胺兰染色法127

4．淋巴细胞甲基绿—派喏宁染色法127

（七）血细胞超活体染色技术128

1．中性红和耶那氏绿单项超活体染色128

2．中性红和耶那氏绿混合超活体染色128

3．中性红和耶那氏绿混合湿层超活体染色129

第四章肌肉组织特染方法130

一、骨骼肌130

（一）骨骼肌苏木精——荧光桃红染色法130

（二）Mallory磷钨酸苏木素（PTAH）染色法131

（三）Heidenhain铁铵矾苏木素染色132

二、心肌133

（一）心传导束纤维高碘酸—Schiff's试剂显示法133

（二）心肌润盘碘酸钠苏木素整块组织染色133

三、平滑肌134

平滑肌分离制片染色技术134

第五章神经组织特殊染色技术135

一、Golgi's神经细胞及突起镀银法135

二、Golgi's—COX法136

三、Cajal's神经原纤维镀银法136

四、Caja1's六法突触显示法137

五、Colgi—jen's突触镀银法137

六、Cajal's吡啶银法（一）138

七、Cajal's吡啶银法（二）138

八、尼氏小体CV、T、M、T合并染色法139

九、尼氏体石碳酸复红染色法139

十、比萨斯克氏神经组织染色法140

十一、神经胶质细胞Ca jal's镀银法140

十二、少突胶质细胞和小胶质细胞Grino改良法141

十三、DelRio—Hortega's小胶质和少突胶质细胞镀银法142

十四、神经胶质细胞Penfield改良法143

十五、大脑皮质细胞分层及各类神经胶质细胞石蜡切片镀银法143

十六、少突胶质和小胶质细胞Marchall法144

十七、Ranson's游离神经末梢染色144

十八、运动云板、肌梭及腱梭镀金技术145

十九、Luxo1快兰—焦油紫正常髓鞘及尼氏体染色法145

二十、Weil髓鞘染色法146

二十一、髓鞘鐭酸染色法147

二十二、Spielmeyer's髓鞘冰冻切片染色法147

二十三、威格特氏（Weigert's）神经髓鞘染色法148

二十四、变性髓鞘Nauta和Gygax染色法149

二十五、Fink Heimer变性髓鞘染色法150

二十六、变性髓鞘新镀银方法151

二十七、Bielschow sky—Gros肠肌神经丛镀银技术152

二十八、中枢神经系统神经终足铬——银浸染技术153

二十九、乙酸胆碱酯酶与硝酸银混合法显示轴突及运动终板154

第六章消化系统特染技术155

一、胃底腺三种细胞Luxol—PAS—桔黄G特染法156

二、胃腺细胞Ma11ory's玫瑰红——亚甲兰——天青Ⅱ染色法156

内分泌细胞（APUD系）染色法157

一、内分泌细胞简易镀银术157

二、Solcia—Capella's内分泌细胞染色法158

三、Ma s son's内分泌细胞镀银法（块染）158

四、嗜银细胞甲基胺——银法159

五、Schmorl's嗜银细胞显示法159

六、嗜银细胞重氮盐显示法160

潘氏细胞特染法160

一、潘氏细胞甲基化Best's卡红法160

二、氨基黑B潘氏细胞染色法161

三、潘氏细胞天青——伊红染色法161

肝脏胆微管显示法161

一、Kopsch's胆微管镀银法162

二、毛细胆管毗啶银法162

三、胆微管铁矾苏木精显示法162

四、肝储脂细胞镀金法163

五、肝枯否氏细胞显示法163

胰岛细胞特染方法164

一、Gomosi's铬矾苏木素和荧光桃红染色法164

二、胰岛细胞Gomori改良染色法165

三、胰岛A、B及D细胞偶氮胭脂红—丽春红桔黄G—亮绿特染法165

四、胰岛细胞硝酸银—醛复红—铅苏木素特染技术166

第七章呼吸系统特染技术167

一、呼吸系统取材技术167

二、肺胶元纤维、弹性纤维及平滑肌特染法168

三、肺弹性纤维染色法168

四、肺网状纤维染色169

五、肺泡Ⅰ型和Ⅱ型细胞锇酸——碘酸钠染色法（Mcnary）169

六、肺K细胞Solcia改良法染色169

第八章循环系统特殊染色170

一、动脉弹性纤维苏木精——复制伊红染色170

二、血管注射切片技术171

（一）血管注射色素配制171

（二）血管注射方法171

1．单色注射法171

2．双色注射法172

第九章泌尿生殖系统特殊染色173

一、肾小球旁器官细胞Bowie's染色法173

二、性染色体染色技术174

第十章内分泌系统特染技术175

一、甲状腺滤泡旁细胞天青A染色175

二、甲状腺滤泡旁细胞镀银法（块染）175

三、肾上腺脂滴染色法176

四、肾上腺嗜铬细胞G iemsa染色法177

五、肾上腺嗜铬细胞镀铬法177

六、脑垂体PAS—桔黄G—甲基兰染色法177

七、Monroe—Formmer's垂体染色178

八、垂体前叶促甲状腺素细胞、促性腺素细胞及嗜碱性细胞特染法178

九、脑垂体细胞分类染色法179

第十一章特殊感官制片技术180

一、内耳制片技术180

（一）内耳块染石蜡切片法180

（二）内耳火棉胶制片方法181

二、眼球制片技术183

（一）眼球火棉胶制片法183

（二）眼球石蜡切片法183

（三）视网膜切片染色技术184

三、皮肤184

（一）皮肤黑色素Dopa反应法184

（二）细胞间桥铁苏木精染色法185

（三）皮肤朗格罕细胞显示法186

内耳双极神经原镀银法186

第三篇组织化学技术188

第一章概论188

一、组织化学的应用范围188

二、应用组织化学方法的特性和要点188

三、组织化学的进展概况188

第二章 组织化学的固定技术189

第三章核酸组织化学190

一、脱氧核糖核酸（DNA）Feulgen反应191

二、脱氧核糖核酸（DNA）NAH-Feulgen法193

三、DAN与RNA甲基绿——派喏宁显示法194

四、DNA与RNASchiff's试剂——甲基兰染色法195

五、DNA、多糖与蛋白质合并染色法195

第四章糖元及多糖类197

一、糖元及多糖高碘酸—Schiff's氏剂显示法（PAS法）197

二、糖元PAS块染技术198

三、阿利新兰显示酸性粘液物质200

四、酸性与中性粘液物质阿利新兰-PAS法（Mowry 1956）200

五、硫酸化和羧化粘液物质醛复红——阿利新兰染色201

第五章蛋白质的组织化学202

一、酪氨酸Millon反应202

二、碱性核蛋白固绿显示法202

三、蛋白质汞溴酚兰显示法203

四、蛋白质结合SH基D.D.D显示法203

五、精氨酸坂口反应法205

第六章脂类染色技术206

一、苏丹Ⅵ（猩红）中性脂肪染色法206

二、中性和酸性脂类Nile兰染色法207

三、中性脂肪苏丹混合染色法207

四、油红O中性脂肪染色法208

五、鐭酸显示脂肪方法208

六、苏丹黑B（SBB）染色法209

七、磷脂Baker's酸性苏木精显示法210

第七章酶组织化学211

一、水解酶212

（一）碱性磷酸酶钙—钴法212

（二）碱性磷酸酶萘酚磷酸显示法213

（三）碱性磷酸酶萘酚AS—BI法214

（四）碱性磷酸酶与糖元联合染色法215

（五）酸性磷酸酶Mac Donald改良法216

（六）酸性磷酸酶偶氮偶联法216

（七）酸性磷酸酶铅法217

（八）酸性磷酸酶萘酚AS—BI法218

（九）三磷酸腺苷酶显示法（Wachstein等）219

（十）Padykula—Herman ATP酶钙钴法219

（十一）ATP酶柠檬酸铅法（小川）220

（十二）5'—核苷酸酶铅法220

（十三）葡萄糖—6—磷酸酶铅法221

（十四）非特异性酯酶偶氮偶联法221

（十五）酸性非特异性酯酶（ANAE）显示法222

（十六）酯酶Gomori吐温铅法223

（十七）磷脂酶硫化铅法224

（十八）胆硷脂酶乙酰硫胆碱显示法224

（十九）ACHE及CHE的铜——铅——硫胆碱法225

（二十）氨基肽酶同时偶联法225

二、脱氢酶226

（一）琥珀酸脱氢酶兰四氮盐法226

（二）琥珀酸脱氢酶新四氮盐法227

（三）白细胞离心琥珀酸脱氢酶显示法227

（四）乳酸脱氢酶显示法229

（五）乳酸脱氢酶Barka Anderson法230

（六）乳酸脱氢酶同功酶PVA法230

（七）葡萄糖—6—磷酸脱氢酶法231

（八）苹果酸脱氢酶法231

（九）异柠檬酸脱氢酶Barka Anderson法232

三、氧化酶与过氧化物酶233

（一）DOPA氧化酶法233

（二）过氧化物酶二胺基联苯胺法233

（三）辣根过氧化酶（HRP）示踪法234

（四）HRP逆行追踪神经系统新方法234

（五）细胞色素氧化酶法235

（六）过氧化物酶显示法236

（七）单胺氧化酶显示法237

（八）单胺氧化酶亚铁氰化铜法237

第八章荧光染色技术238

一、荧光的基本概念238

二、荧光染料239

三、DNA荧光Feulgen染色法239

四、DNA、蛋白质双重荧光组化技术240

五、DNA与RNA吖啶橙荧光染色240

六、荧光PAS反应241

七、淀粉样物质刚果红荧光染色法241

八、类脂中性红荧光染色241

九、核仁（核小体）吖啶橙——甲基绿荧光染色242

十、曲利本兰显示弹性纤维的荧光染色技术242

第九章单胺递质荧光组化技术243

一、生物单胺递质荧光组化技术应用244

二、显示单胺类物质荧光组化实验技术和原理245

（一）甲醛诱发显示去甲肾上腺素（NE）的荧光组化方法245

（二）多聚甲醛诱发显示神经纤维和肥大细胞中单胺荧光组化法245

（三）甲醛诱发单胺荧光化学反应245

（四）乙醛酸诱发显示单胺荧光法247

（五）乙醛酸诱发单胺荧光化学反应247

（六）显示组织胺的邻苯二醛荧光组化法248

（七）组织胺与邻苯二醛化学反应249

第十章实验室溶液的配制249

一、百分比浓度溶液249

二、当量浓度溶液计算250

三、克分子浓度溶液计算252

四、各类缓冲溶液配制附表252

五、标准缓冲液的配制254

六、玻璃器皿洗涤方法258

第四篇胚胎学技术260

一、鸡胚整装片技术260

二、胚眙连续切片技术261

第五篇显微摄影技术262

一、全自动显微摄影及其装置262

二、自动摄影装置组件262

三、自动摄影的方法与程序263

（一）全自动黑白显微摄影方法和程序263

（二）全自动彩色显微摄影技术264

（三）半自动显微摄影技术265

各种胶卷感光度换算表267

四、彩色荧光照相倒易律失效的解决方法267

五、显微照相底片放大倍数计算方法268

六、玻片标本曝光补偿269

七、常用黑白摄影胶片和照片冲洗技术270

（一）显影和显影剂配方270

（二）停影和定影270

（三）水洗和干燥271

（四）照片放大（印相）显影液配方271

八、常见彩色摄影胶卷和照片冲洗技术271

（一）彩色负片冲洗及配方271

1．保定油溶剂彩色负片冲洗技术271

2．保定上海水溶性负片冲洗和配方技术272

3．柯达（kodok）彩色Ⅱ型负片冲洗配方技术272

4．柯达彩色（负片）相纸冲洗配方技术273

（二）柯达（kodak）彩色反转片E—6配方冲洗技术273

1．E—6溶液配制273

2．冲洗的几个重要技术问题274

3．E—6冲洗程序275

4．E—6冲洗步骤简表276

5．问题分析277

6．E—6反转冲洗液的保存277