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第一章组织材料的处理 盐坡贞夫1

一、前言1

二、小动物的非固定取材2

三、小动物的灌流固定5

四、冰冻切片的制作6

五、非冰冻切片的制作12

六、冰冻切片与石蜡切片的比较13

七、组织材料处理必要试剂的特性和配制方法14

八、明胶化载片及硅化载片的制作17

九、有关原位分子杂交组织化学、免疫组织化学用的切片制作方法小结18

第二章原位分子杂交组织化学21

一、前言 盐坡贞夫21

二、原位分子杂交组织化学简介 盐坡贞夫21

三、在原位分子杂交组织化学使用的标记探针 盐坡贞夫22

四、使用同位素标记的合成探针的原位分子杂交法 仙波美惠子24

(一)合成探针的制备24

(二)组织切片的制作28

(三)杂交前处理28

(四)杂交反应31

(五)反应的显示35

五、用非放射性物质标记合成探针的原位分子杂交法 木山博资38

(一)探针的制备39

(二)杂交反应43

(三)原位分子杂交的对照实验49

(四)在消化管等内源性AP活性高的组织进行原位分子杂交51

(五)同时证明二种mRNA的方法51

六、使用同位素标记的cRNA探针的原位分子杂交法 和中明生53

(一)探针的制备53

(二)组织切片制作62

(三)组织切片的杂交前处理63

(四)杂交反应65

(五)反应的显示——放射自显影68

七、用非放射性物质标记cRNA探针的原位分子杂交法 岩田弘、盐坡贞夫70

(一)探针的制备71

(二)组织切片的杂交前处理76

(三)杂交反应的操作步骤76

(四)抗原-抗体反应及显色反应77

八、放射自显影法 稻垣忍79

(一)宏观放射自显影80

(二)微观放射自显影84

(三)电镜放射自显影88

一、前言92

第三章免疫组织化学 盐坡贞夫92

二、抗血清、抗体93

三、可视标记物的种类94

四、免疫染色法的种类及操作步骤95

五、免疫组织化学的注意事项101

第四章免疫电镜法 高木宏103

一、前言103

二、免疫电镜法的原理103

三、标记物的选择104

四、组织的固定105

五、包埋前染色法106

六、包埋后染色法111

七、冰冻超薄切片法115

(一)冰冻超薄切片法(包埋前染色)的特点115

(二)冰冻超薄切片的操作步骤116

八、免疫电镜在神经科学上的应用118

(一)双重或多重标记法119

(二)免疫电镜法与其他方法的并用120

第五章Northern杂交法 加藤启子、佐藤真125

一、总RNA、mRNA纯化125

(一)总RNA纯化125

(二)mRNA纯化129

(三)RNA纯度标准133

二、Northern杂交133

(一)RNA的电泳133

(二)转移吸附136

(三)探针的制作方法138

(四)杂交反应140

第六章Western印迹法 加藤启子143

一、前言143

(一)所用器具和溶液144

二、抗原的提取法144

(二)操作步骤145

(三)蛋白质定量146

三、凝胶电泳147

(一)所用器具和溶液147

(二)操作步骤149

四、转膜吸附150

(一)所用器具和溶液150

(二)操作步骤151

五、膜的封闭152

六、抗原抗体反应153

(一)第一抗体与抗原反应153

(二)标记的第二抗体与第一抗体的反应153

七、呈色反应156

(三)膜的洗涤156

一、前言157

二、蛋白质的标记157

(一)用125I进行表画标记157

第七章免疫沉淀法 宫本泰豪、盐坂贞夫157

(二)用32S进行生物合成标记158

三、可溶化158

四、免疫沉淀159

第八章蛋白质标记法 今泉和则、高木勉161

一、前言161

二、放射性碘的蛋白质标记法161

(一)原理162

(二)所用试剂162

(三)标记法步骤163

(一)原理166

三、非放射性物质的蛋白质标记法166

(二)所用试剂168

(三)标记步骤169

第九章神经细胞培养法 金承业170

一、前言170

二、大鼠脊神经节神经细胞的培养172

(一)所需物品173

(二)操作步骤174

三、大鼠大脑皮质神经细胞的培养177

(一)所需物品178

(二)操作步骤178

四、用免疫细胞化学方法对神经细胞的确认181

译者后记184

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