《PCR技术在临床医学中的应用》

第一章 核酸的基础知识1

第一节 概述1

第一篇 基础知识1

第二节 核酸的化学组成2

第三节 核酸的结构5

第四节 核酸的性质及有关研究方法11

第二章 生物的GC MOL%测定18

第一节 浮力密度梯度离心法18

第二节 热变性温度法19

第三节 高效液相色谱(HPLC)法19

第四节 DNA溴化反应20

第五节 脱嘌呤反应20

第六节 pH 3.0时的吸收比率(ε260/ε280)21

第七节 UV吸收测定DNA碱基成分和浓度22

第八节 其他方法22

第一节 复性和杂交的动力学23

第三章 生物间DNA同源性测定23

第二节 复性速率法24

第三节 固相杂交法24

第四章 核酸的体外扩增技术26

第一节 转录依赖的扩增系统26

第二节 3SR系统26

第三节 连接酶链反应27

第五章 PCR反应的原理及种类29

第一节 PCR反应的基本原理29

第二节 聚合酶链反应的种类32

第六章 PCR样品的制备35

第一节 从全血细胞中快速提取DNA35

第二节 从血清中快速提取DNA36

第三节 从痰标本中提取DNA36

第五节 从临床拭子标本中提取DNA37

第四节 从尿标本中提取DNA37

第六节 从体液标本中提取DNA38

第七节 从组织标本中提取DNA39

第八节 从绒毛、羊水标本中提取DNA39

第九节 从细菌培养物中提取DNA40

第十节 从法医学标本中提取DNA41

第七章 PCR扩增产物的检测分析43

第一节 琼脂糖凝胶电泳法43

第二节 聚丙烯酸胺凝胶电泳法45

第三节 限制性内切酶分析法46

第四节 核酸探针杂交鉴定47

第五节 单链构型多态性分析法49

第六节 酶免疫分析法51

第七节 PCR污染的处理53

第八章 性传播疾病(STD)PCR检测55

第二篇 临床应用55

第一节 淋病奈瑟氏菌的PCR检测56

第二节 沙眼衣原体的PCR检测58

第三节 解脲脲原体的PCR检测60

第四节 人乳头瘤病毒的PCR检测61

第五节 梅毒螺旋体的PCR检测64

第六节 单纯疱疹病毒的PCR检测67

第七节 巨细胞病毒的PCR检测70

第八节 人类免疫缺陷病毒的PCR检测73

第九节 性传播疾病多重PCR检测78

第九章 病毒性肝炎的PCR检测80

第一节 甲型肝炎病毒的PCR检测81

第二节 乙型肝炎病毒的PCR检测84

第三节 丙型肝炎病毒的PCR检测87

第四节 丁型肝炎病毒的PCR检测90

第五节 戊型肝炎病毒的PCR检测92

第十章 呼吸道疾病病原体的PCR检测95

第一节 结核杆菌PCR检测95

第二节 肺炎支原体PCR检测97

第三节 肺炎衣原体PCR检测99

第四节 军团菌PCR检测101

第五节 EB病毒PCR检测104

第十一章 常见寄生虫疾病病原虫的PCR检测107

第一节 弓形体PCR检测107

第二节 恶性疟原虫PCR检测110

第三节 间日疟原虫PCR检测113

第四节 卡氏肺孢子虫PCR检测114

第五节 隐孢子虫PCR检测117

第六节 阿米巴原虫PCR检测119

第七节 利什曼原虫PCR检测123

第八节 蓝氏贾第鞭毛虫PCR检测125

第九节 锥虫PCR检测128

第十节 旋毛线虫PCR检测131

第十二章 常见肿瘤基因标志的PCR检测134

第一节 肿瘤概论134

第二节 常见肿瘤ras癌基因突变PCR检测146

第三节 胰腺癌PCR检测150

第四节 p53基因突变的PCR检测154

第五节 APC基因突变PCR检测158

第六节 C-erbB2基因扩增的PCR检测160

第七节 DNA聚合酶β基因突变163

第八节 乳腺癌在腋下淋巴结中的微转移PCR测定165

第十三章 造血系统恶性肿瘤基因标志的PCR检测168

第一节 白血病概述168

第二节 急性髓细胞白血病AML1-MTG8融合基因PCR检测170

第三节 急性早幼粒细胞白血病RARa/PML和PML/RARa融合基因mRNAPCR检测173

第四节 慢性粒细胞白血病bcr/abl融合基因mRNAPCR检测176

第五节 急性淋巴细胞性白血病E2A/PBX1融合mRNAPCR检测180

第六节 急性淋巴细胞白血病T细胞受体基因重排PCR检测182

第七节 B淋巴细胞白血病免疫球蛋白重链基因重排PCR检测185

第八节 白血病患者体内的多药耐药基因表达PCR检测187

第十四章 遗传病基因的PCR检测191

第一节 地中海贫血的PCR检测192

第二节 苯丙酮尿症PCR检测196

第三节 血友病PCR检测200

第四节 脆性X综合征PCR检测204

第五节 DMD/BMD进行性肌营养不良症PCR检测208

第六节 G-6-PD缺乏PCR检测212

第七节 视网膜包囊素变性视紫红质基因PCR检测214

第八节 视网膜母细胞瘤基因PCR检测217

第九节 性别发育异常SRY基因PCR检测219

第十节 镰状细胞性贫血PCR检测221

第一节 产不耐热肠毒(LT)大肠杆菌PCR检测224

第十五章 消化道疾病病原体的PCR检测224

第二节 产耐热肠毒素大肠杆菌的PCR检测226

第三节 痢疾志贺氏菌PCR检测227

第四节 沙门杆菌属PCR检测231

第五节 霍乱弧菌PCR检测232

第六节 副溶血弧菌PCR检测233

第七节 空肠弯曲菌PCR检测234

第八节 用PCR检测幽门螺杆菌235

第九节 轮状病毒PCR检测238

第十节 耶尔森菌PCR检测240

第十一节 婴幼儿腹泻腺病毒PCR检测241

附录一 PCR常用试剂配制244

附录二 分子生物学常用名词解释250

附录三 PCR相关技术名词解释254

附录四 PCR技术常用数据257