《表1 三步法去除内毒素纯化与回收效率表》

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《重组SOD发酵液去除内毒素的效果研究》

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通过活性炭吸附和Triton X-114萃取相结合方式去除内毒素，试验结果如表1所示。经过第一轮5%活性炭吸附，内毒素含量从未处理前的4.0×104EU/mL降低至约10 000 EU/mL，内毒素吸附率达75%；SOD酶活力从未处理前的37 500 U/mL降低至31 500 U/mL，该步骤的目标蛋白回收率为81.4%。经过第二步的Triton X-114反复萃取，蛋白溶液中内毒素进一步降低至200 EU/mL，仅为未处理前蛋白溶液中内毒素含量的0.5%，目标蛋白SOD的回收率仍维持在79.6%左右。经过以上两步纯化步骤后，蛋白溶液中内毒素含量为每10 000酶活单位内毒素含量为57 EU效价，仍然略高于药典中对注射药品内毒素限值50 EU/10 000 U酶活的要求。因此随后继续增加一步活性炭吸附操作，蛋白溶液中细菌内毒素的含量降低为80 EU/mL，目标蛋白SOD的回收率为66%，可以换算成蛋白溶液中内毒素含量为每10 000酶活单位内毒素含量为26.8 EU效价。