《表2 粗脂柱层析分离时的梯度洗脱顺序》

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《城镇污泥中神经酰胺的分离纯化》

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注:洗脱顺序中的数字代表用φ1×10cm的试管承接洗脱流出液时，间隔大约50mL流出液时计数一次，并在薄层硅胶板上点样一次.

用不同极性的石油醚-乙酸乙酯进行洗脱（表2），结果如图5所示.洗脱梯度为石油醚:乙酸乙酯200:1，180:1，160:1，140:1，120:1和100:1（V/V）时，从粗脂中分离出的组分均为弱极性物质.洗脱梯度为石油醚-乙酸乙酯80:1，60:1，40:1，20:1和10:1（V/V）时，洗脱出极性大小接近待分离的目标产物物质，即图4中标记的（1）（2）（3）成分.当石油醚-乙酸乙酯9:1，8:2和7:3（V/V）洗脱时，从流出液中检测到目标产物.硅胶柱为正相柱，相对强极性的洗脱剂可以将样品中的弱极性物质洗脱出来，则可以将洗脱梯度简化为石油醚-乙酸乙酯100:1，10:1和7:3（V/V）.