《表1 流动相梯度洗脱条件》

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《高效液相色谱-荧光检测法测定发酵红肉制品中Neu5Gc》

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通过不同色谱柱分离效果对比，发现使用安捷伦ZORBAX Eclipse XDB-C18色谱柱（150 mm×4.6mm×5μm）分离效果最佳。通过初步流动相体系筛选，选用甲醇-水作为流动相体系，并对不同流动相体积分数配比进行优化，结果如图2所示。实验表明:当流动相A为超纯水，B为甲醇溶液，体积比为80∶20洗脱，能使Neu5Gc杂质的峰与主成分峰分离有效分离（分离度R>1.5），如图3所示；且峰形良好，Neu5Gc的保留时间为14.484 min，如图4所示。并且采用梯度洗脱能显著降低检测时间，提高检测效率，梯度洗脱程序如表1所示。