《表2 21对SSR引物详情》

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《基于SSR技术的古银杏群体遗传结构分析》

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采用改良的CTAB法（沈永宝等，2001）提取银杏叶片基因组DNA，存放于-20℃备用。从本实验室开发的556对SSR引物中筛选出21对多态性较高的SSR引物进行本研究，包括转录组（ESSR）8对和基因组SSR（GSSR）13对（Zhou et al.，2016），详情见表2。引物由南京金斯瑞生物科技有限公司合成。10μL SSR-PCR扩增反应体系包括:1×buffer缓冲液；d NTPs的浓度为0.2 mmol·L-1；镁离子浓度为2.5 mmol·L-1；上下游引物浓度均为0.2μmol·L-1；1 U Taq DNA聚合酶和DNA模板30 ng；反应程序为:94℃预变性5 min；94℃变性30 s，最佳退火温度（Tm）时间30 s，72℃延伸1 min，30个循环；72℃延伸1 min；10℃保存。PCR产物利用8%聚丙烯酰胺凝胶电泳技术检测，根据PCR产物条带大小从小到大依次用大写英文字母A、B、C等表示。