《表2 48对SSR引物信息》

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《红花油脂相关性状与SSR分子标记的关联分析》


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采用改良后的CTAB法提取基因组DNA,并用1%琼脂糖凝胶电泳和超微量紫外分光光度仪检测DNA的质量和浓度,将浓度统一稀释至50 mg/L左右,-20℃下冰箱保存备用。在已开发的SSR标记中筛选出48对多态性及特异性好的引物(SSR引物均由武汉擎科生物公司合成),引物详细信息见表2。PCR总反应体系为10μL,其中包含红花基因组DNA 1μL,2×Taq Plus Master MixⅡ(武汉擎科生物公司)5μL,正反向引物各0.25μL,用dd H2O补齐至10μL。PCR反应程序为94℃预变性3 min;94℃变性30 s,退火温度根据引物Tm值设定,时间为30 s,72℃延伸30 s,共35个循环;总延伸5 min。扩增产物经4.0%聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,银染显色。