《表2 原位显微镜在动物细胞培养中的应用》

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《原位显微镜在细胞生物量在线监测中的发展与应用》

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原位显微镜在动物细胞中的应用相对较晚，直到2002年，Joeris等[49]利用机械采样原位显微镜对CHO细胞进行在线监测，2004年，Guez等[50]利用原位显微镜对杂交瘤细胞的高密度发酵进行在线监控。此后，Rudolph等[37]首次将原位显微镜应用于贴壁生长的小鼠成纤维细胞中，首先基于显微图像开发出一种算法，分割微载体与细胞；其次基于神经网络算法估测微载体的分段图像区域的电镀效率和细胞定植水平；2010年，Burgemeister等[40]基于Cell Vi CAM算法以及半自动支持向量机（SVM）训练，利用暗场显微镜对腺病毒EI基因改造的人神经细胞系AGEI.HN进行在线监测，其算法识别细胞的准确率达到86%，对细胞活力鉴定的准确性达到了87%。因支持向量机不是完全自动，2011年Wiedemann等[35]通过计算显微照片中高熵细胞的比例判定细胞的活力。此后Lüder等[46]将原位显微镜与中红外光谱连用，监测CHO细胞系的发酵过程。表2汇总了原位显微镜技术在动物细胞培养过程中的应用情况。由表2可知，在动物细胞的发酵过程中原位显微镜是一种有力的在线监测工具，其准确性高，并且与离线方法能够良好拟合。