《表1 Real-time PCR引物序列》

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《鼠伤寒沙门菌中甲基化修饰调控PhoP活性的机制研究》


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反应体系20μL,含2×Fast SYBR Mixture 10μL,10μmol/L引物各8μL,c DNA样品2μL。使用Thermo Quant Studio 3荧光定量PCR仪检测,程序设置参数如下:95℃预变性30 s;95℃变性3 s,60℃退火30 s,共40个循环。以16S核糖体RNA(ribosomal RNA,rRNA)为内参,结果按照2-ΔΔCt方法进行分析,比较各样品中phoP及其下游基因镁离子转入P型ATP酶(Mg2+importing P-type ATPase,mgtA)、镁离子转运蛋白(magnesium transporter,mgtC)、多药耐药外排泵(multidrug resistance efflux pump,pmrA)和外膜侵袭蛋白(outer membrane invasion protein,pagC)的转录水平变化。引物序列见表1。