《表3 实时定量PCR加样体系》

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《转录因子WRKY6和PR1在拟南芥胁迫记忆中的表达模式》


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温和混匀后,瞬时低速离心,放入PCR仪中,42℃,60 min;70℃,10 min。程序结束后,按照2μg的RNA浓度计算,将cDNA原液进行10倍稀释,即20μL原液加入180μL ddH2O,总体积为200μL。稀释后的cDNA每管各取20μL收集在一个离心管中,记为STD 100,将STD 100稀释10倍记为STD 10-1,将STD 10-1再次稀释10倍记为STD10-2,以c DNA样品作为模板,用Perl Primer软件设计Real-time PCR引物,以EIF4基因作为内参基因。引物见(表3),按照20μL反应体系进行加样。