《表1 引物序列设计:华山壮骨散治疗SANFH作用机制的实验研究》

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《华山壮骨散治疗SANFH作用机制的实验研究》


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取大鼠股骨头,放入已装有TRIzol的Ep管内,做好标记,放入-70℃冰箱保存备用。取大鼠肾脏的皮质约50~80 g,放入已装有TRIzol的Ep管内,做好标记,放入-70℃冰箱保存备用。然后按照TRIzol试剂说明书采取一步法提取股骨头和肾脏中总RNA。计算样品总RNA浓度,完成股骨头和肾脏中总RNA的制备;根据大鼠BMP2和Smad2 cDNA序列,使用Premier 5.0设计合成了扩增BMP2和Smad2片段的特异性引物(以β-actin基因作为PCR的内参照),进行引物序列设计(见表1);再依据逆转录反应体系及条件以及PCR反应体系及条件,进行RT-PCR试验。为减少误差,各组BMP2和Smad2的表达水平均以相对表达量表示。