《表1 ISSRs正交试验》

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《大豆孢囊线虫ISSR反应体系的建立与优化》

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μL

采用L16（44）正交试验设计，对引物、dNTPs、Taq酶、模板DNA进行4因素4水平筛选（表1）。反应总体系为25μL，10×PCR Buffer 2.5μL，最后用ddH2O补足25μL。反应扩增程序:94℃5 min；94℃30 s，55℃45 s，72℃1 min，34个循环；72℃10 min，最后4℃保存。每个处理设3次重复复。。11%%的的琼琼脂脂糖糖凝凝胶胶电电泳泳检检测测，，44SS GGrreeeenn PPlluuss无无毒毒核核酸酸染染料料染染色色；；DDLL22000000的的DDNNAA MMaarrkkeerr（ （110000～～22 000000 bbpp）） 为为标标记记，，在在BBiioo--RRAADD凝凝胶胶成成像像系系统统观观察察并并照照相相。。