《表1 引物序列:酸枣仁汤通过抑制APP/PS1双转基因小鼠海马神经炎症发挥神经保护作用》

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《酸枣仁汤通过抑制APP/PS1双转基因小鼠海马神经炎症发挥神经保护作用》


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摘眼球取血后,端头取脑,冰上分离海马,置液氮速冻后转移至-80℃冰箱保存。取海马30 mg,置1.5 m L离心管中,加入trizol 1 m L提取海马总mRNA,提取后用核酸蛋白测定仪检测各样品纯度,当纯度为1.8~2.0进行逆转录;用PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser试剂盒对纯度合格样本逆转录合成c DNA;按照Premix TaqTMVersion 2.0试剂盒添加荧光试剂后,再置于Real-time PCR仪进行实时荧光定量反应。反应条件设置为94℃4 min,94℃30 s,60℃30 s,72℃30 s,72℃10 min,共40个循环。分析Real-time PCR实验过程中各样本的Ct值,以2-ΔΔCt表示mRNA相对表达水平。各目的基因及内参β-肌动蛋白(β-actin)均由武汉Servicebio公司设计和合成,基因序列见表1。