《表2 芽诱导率方差分析》

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《玄参组织培养及炼苗技术》

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注:df均为3（表3同）。

组织培养快速繁殖技术的关键在于不定芽是否诱导成功，而不定芽诱导成功的关键是植物激素，包括激素的浓度、种类以及不同激素的组合方式，大多数科研中常选用2种或3种植物激素配合使用诱导不定芽，少数只使用1种或使用3种以上植物激素诱导获得再生植株[10-11]。本实验选用6-BA，2，4-D和NAA通过正交设计，计算其芽诱导率和芽增殖倍数，K值分析0.5 mg·L-16-BA+0.2 mg·L-1NAA芽诱导率达100%，芽增殖倍数高达9.84。由于6-BA难溶于水，本实验分别采用弱酸、弱碱进行溶解，发现用1%稀盐酸溶解的6-BA其不定芽及生根诱导率高，这可能与玄参喜微酸的环境有关。表2中选择2，4-D的外植体对愈伤组织的诱导作用增强，因而不定芽诱导出现2条途径，经愈伤组织和不经愈伤组织（直接出芽），经愈伤组织后整个外植体的细胞经分化生长成淡绿色的细胞团（图1C），整个细胞团均可产生芽点长出不定芽；而不经愈伤组织的外植体主要是在叶片的伤口处吸收营养物质，从而膨大长出芽点（图1B）。实验表明，缺乏2，4-D是导致直接出芽的原因，这与任如意等[12]研究的结论一致，认为2，4-D对不定芽的诱导与增殖没有很大的促进作用，可能是抑制作用。本实验选择30 d玄参离体快速繁殖，不经愈伤组织要优于经愈伤组织，因为芽诱导率和芽增殖倍数比较高，并且周期要缩短20～30 d，但是要面对不定芽主要局限于外植体的切口处这一不足之处。不定芽生根诱导也是组织快速繁殖的关键步骤，本实验比较了MS和1/2MS附加IBA培养基，得到1/2MS适于生根培养，吴秀华等[13]、朱桥等[14]也得出同样结论，认为这可能是培养基中无机盐成分降低有助于外植体生根。