《表1 各组人骨肉瘤细胞内荧光素酶活性》

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《构建TRAF6基因3’非编码区荧光素酶报告质粒验证及与潜在靶基因TRAF6的靶向关系》


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表注:与无核苷类似物对照+TRAF6野生型3'-UTR(对照组)比较,aP=0.000。

将重组质粒、及miRNA片段共转染Saos-2细胞株,每个转染组重复实验3次,使用双萤光素酶报告基因系统分析其相对荧光素酶活性。其中miR-146a-5p-核苷类似物+TRAF6野生型3'-UTR共转组相对荧光素酶活性与对照组明显降低(P<0.01),见表1。TRAF6-野生型+抑制剂组相对荧光素酶活性与对照组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。TRAF6野生型3'-UTR转染组相对荧光素酶活性比与对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。pYr-MirTarget空载体组相对荧光素酶活性比pYr-MirTarget-TRAF6组明显升高(P<0.01)。转染核苷类似物(mimics)后相对荧光素酶活性明显减少,说明TRAF6的3'UTR能与miR-146-5p相互作用,抑制海肾荧光素酶的活性,因此TRAF6可能是miR-146-5p的直接靶基因。