《表4 双荧光素酶活性：MiR-410靶向CCNB1抑制肾透明细胞癌增殖的研究》

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《MiR-410靶向CCNB1抑制肾透明细胞癌增殖的研究》

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注:P值为各组与miR-410+CCNB1 MUT组比较结果

为了进一步探讨miR-410的作用机制，运用生物信息学软件预测miR-410潜在的靶基因，将潜在靶基因取交集后发现CCNB1。CCNB1是一种细胞周期调控蛋白，常在肿瘤组织中表达。由于CCNB1在癌症中的重要性，选择CCNB1进一步研究。荧光素酶基因报告实验显示miR-410过表达降低野生型的3’UTR序列的荧光素酶的活性，而突变型的3’UTR序列的荧光素酶活性没受到明显影响，见图5、表4。提示CCNB1是miR-410的直接靶点。人RCC细胞Caki-2转染miR-410模拟物48 h后，采用Western blotting测定细胞中蛋白CC-NB1表达水平。CCNB1蛋白表达下降，说明miR-410-mimic转染后过表达的miR-410抑制了CC-NB1蛋白的表达，见图6。