《表1 类器官培养基成分》

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《类器官及其应用的研究进展》

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均含基础培养基补充成分:Glutamax、HEPES、B27、N2、N-acetylcysteine.上标数字为加入该生长因子对应的类器官生长阶段:0为各阶段均添加；1，2分别为生长及分化阶段；1，2，3分别为生长、扩增、分化阶段.

消化道自口腔起经食道、胃、十二指肠、空肠、回肠、大肠至肛门.肠是消化道的重要器官，目前肠道类器官尤其是小肠类器官是研究最多最广泛的模型之一.肠道类器官培养主要以荷兰Clever团队提出的基于Matrigel的培养系统为代表[3]（表1），在体外分离得到哺乳动物单个干细胞或经EDTA（乙二胺四乙酸）消化得到小肠隐窝后，经磷酸缓冲液（phosphate buffered solution，PBS）多次洗涤和离心，将其重悬在基质胶中，待其固化后加入含有表皮生长因子（epidermal growth factor，EGF）、N2、B27、R-spondin、Noggin等细胞因子的培养基进行传代培养[3，9].其中，人小肠类器官培养时需添加前列腺素E2以及胃泌激素.小肠类器官可在基质胶由最初球状隐窝形态向类似绒毛状转变并逐渐形成空腔，经历“出芽”生长分化为复杂的高级器官结构，可在体外实现8个月的传代培养[3].与小肠类器官培养方法类似，结直肠类器官也可由结肠提取隐窝经诱导生长和分化获得.不同的是，Sato等[9]发现结肠类器官的Wnt相关基因表达量远远低于小肠类器官，难以维持其长期生长.因此在培养结肠类器官时，需要在培养基中补充Wnt3A细胞因子.而对于人源结肠类器官，Alk4/5/7、p38抑制剂A83-01和SB202190的添加可使类器官体外培养延长至6个月[9]（表1) .