《表1 梯度洗脱表（体积分数/%）》

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《响应面法优化荷叶生物碱盐提取工艺及其纯化》

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准确称取荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱标准品及样品粉末，用质量分数0.2%盐酸溶液溶解，过膜，以乙腈为流动相A，以质量分数0.1%三乙胺水溶液为流动相B，按照表1进行梯度洗脱。流速：1.0 mL/min；检测波长：270 nm；进样量：3μL；柱温：25℃；最大压力限：60 MPa。以质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得出荷叶碱的回归方程为y=7.4461x+14.686，R2=0.9991，说明荷叶碱在0～250 mg/L内线性关系良好；N-去甲基荷叶碱的回归方程为y=7.9501x-1.2818，R2=1，说明N-去甲基荷叶碱在0～120 mg/L内线性关系良好；O-去甲基荷叶碱的回归方程为y=9.7551x+3.5376，R2=0.9915，说明O-去甲基荷叶碱在0～12 mg/L内线性关系良好。