《表1 各组调酸培养基抑制霉菌生长的临界添加量》

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《低温大曲酵母菌分离和计数培养方法优化》


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为比较不同浓度、不同种类有机酸(乙酸、乳酸、丙酸)和乙酸与乳酸组合抑制霉菌的效果,获取优化培养基,本研究共设计了6类培养基。首先确定接种大曲样品稀释液后,几乎无霉菌生长时的有机酸最小添加值。利用梯度调酸的培养基对3种低温大曲进行微生物分离,30℃恒温培养72h后,观测记录各组培养基抑制霉菌生长时有机酸的最小浓度添加量。结果表明:(1)单加乙酸、(2)乙酸乳酸1:1、(3)乙酸乳酸1:2、(4)乙酸乳酸1:3,4种调酸培养基无霉菌出现生长时乙酸对应的临界添加量分别为:3.3mL/L、3.0mL/L、2.3mL/L、2.0mL/L,此时的临界培养基依次命名为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ;(5)单加丙酸培养基中无霉菌生长时丙酸临界添加量为2.0mL/L,此时对应的临界培养基命名为Ⅴ;(6)单加乳酸的培养基中当乳酸的添加量达到20.0mL/L时也无法抑制霉菌对酵母菌分离的干扰,经鉴定该培养基最主要的干扰霉菌为黄曲霉Aspergillus flavus Link,且随乳酸添加量增加,Aspergillus flavus的颜色加深。故与其他调酸培养基相比,单加乳酸的培养基并不能很好地抑制霉菌生长。但当与乙酸配合使用时,可降低乙酸的添加量。由上述结果可得除(6)之外,各组调酸培养基均能通过添加量的调配,实现对低温大曲丝状真菌生长的抑制(表1),且丝状真菌的生长与培养基pH值的大小无直接联系。在无丝状真菌出现的情况下,临界酸值处酵母菌的数量相对为各组培养基分离的最大值,可视为每类调酸培养基的最优培养基。