《表3.温度对Ana.Pif1与Bs.Pif1解旋速率的影响》

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《嗜热细菌Anaerobaculum hydrogeniforman Pif1解旋酶的异源表达与解旋反应特性》

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由于Ana.Pif1解旋酶是源于嗜热细菌Anaerobaculum hydrogeniforman内编码蛋白，因此我们探究了不同温度对该解旋酶活性的影响。在不同温度下，Stopped-flow监测Ana.Pif1解旋相同底物5?-OhS26D17的特征曲线，通过拟合与计算，我们发现:从20°C至45°C逐步增加反应温度，Ana.Pif1解旋速率会稳步增加（解旋幅度也同时稳定增加）；当反应温度由45°C至55°C继续升温，解旋速率更是增加明显；当60°C时，解旋速率与幅度骤然下降（解旋速率见表3）。同时，对比测试Ana.Pif1与Bs.Pif1在不同温度下的解旋速率变化，结果如图6所示，不同于普通细菌Pif1解旋酶（Bs.Pif1）的最佳反应温度为25°C，Ana.Pif1解旋酶的最佳反应温度（55°C）远远高于前者，这表明该解旋酶具有嗜热特性。