《表2 TsCel12A晶体数据》

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《Thermotoga sp.RQ7内切纤维素酶TsCel12A蛋白的酶学性质和晶体学研究》


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捞取Crystal Screen HT 71条件中的平行四边体单晶(135μm×90μm×10μm),和WizardⅢ&Ⅳ49条件中的伞形晶体,于SSRF的BL17U线站衍射,均未收集到有效的衍射点(图3(a)).在Crystal Screen HT71优化条件的基础上尝试了添加剂和分别与葡萄糖、β-D-纤维二糖和对硝基苯-β-D-纤维二糖苷3种底物进行共结晶,共结晶均为沉淀,尚未有加强作用.将重新纯化的浓度约为40mg/mL的Ts Cel12A进行结晶,筛选出Crystal Screen HT 14条件:0.2mol/L Calcium chloride dihydrate,0.1mol/L HEPES sodium pH 7.5,28%(体积比)Polyethylene glycol 400,所得晶型为平行六面体(图3 (c)),于SSRF的BL17U线站衍射,获得晶体数据(表2).Ts Cel12A蛋白晶体的分辨率2.36,所属空间群为P 6 2 2,晶胞参数为a=184.974,b=184.974,c=49.873,α=90°,β=90°,γ=120°.