《表1 16S rDNA序列Blast比对》

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《腐乳中产生物胺菌株的筛选鉴定及产生物胺能力评价》

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该产胺菌初筛培养基加入了多种氨基酸和显色剂溴甲酚紫，当微生物利用氨基酸合成碱性的生物胺时，会使培养基里的菌落周围呈现紫色光晕[13]。经过3次划线分离，从24种市售腐乳样品中初步分离筛选到可能具有氨基酸脱羧酶活性的细菌91株。但由于显色反应是简单的酸碱变色反应，若细菌在培养基中产生除生物胺以外的碱性物质，也会出现紫色菌落，这样就会造成假阳性情况，故需进行HPLC验证，以确定菌株是否产生物胺。经过HPLC法检测91株紫色菌落在复筛液体培养基中的生物胺含量，结果表明有30株菌不产生物胺。在产生物胺的61株菌中，85%的菌株同时产组胺、腐胺、酪胺，仅有少量的菌株产生亚精胺。将产生物胺量较高的前20株菌通过16SrDNA扩增、测序、BLAST比对，鉴定结果如表1所示。鉴定结果表明，产生物胺总量较高的20株菌均为芽孢杆菌属，如表1，分别为6株枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、5株巨大芽孢杆菌（Bacillus megaterium）、3株长形赖氨酸芽胞杆菌（Lysinibacillus macrolides）、2株蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）和4株热带芽孢杆菌（Bacillus tropicus）。将枯草芽孢杆菌单个菌落涂片染色，在油镜下观察菌体情况。可观察到其形态为:白色，粗糙褶皱，边缘不整齐。其简单染色特征如下图1: