《表1 利用潮霉素抗性筛选植株的发芽率》

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《水稻miR395d基因过表达载体的构建及功能初步分析》

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注:WT:野生型日本晴；OE-1～OE-10:miR395d过表达株系

利用潮霉素抗性筛选阳性植株，野生型对照WT在潮霉素溶液中不能萌发，能正常萌发并生长的为阳性植株，反之则为假阳性植株（图2A）。由种子萌发率可见（表1），miR395d过表达株系中OE-1、OE-2、OE-3和OE-4萌发率达到98%以上，而其它株系萌发率低，表明在转化过程中未转成功，造成假阳性。检测OE-1、OE-2、OE-3和OE-4根部miR395d基因表达量（图2B），发现与野生型日本晴相比，OE-2、OE-3、OE-4转基因植株中miR395基因表达量极显著升高，其中，在OE-1转基因植株中则表达量低，可能在转化中表达受到抑制，而在OE-4转基因植株基因表达量升高最为显著。表明miR395d过表达转基因材料构建成功。根据以上验证结果，选取OE-2、OE-3、OE-4与野生型WT进行下一步试验。